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甲状腺球蛋白诱导甲状腺炎模型

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  • 甲状腺球蛋白诱导甲状腺炎模型
  • 上海
  • 2025年12月24日
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      上海达为科生物科技有限公司

    • 服务名称

      甲状腺球蛋白诱导甲状腺炎模型

    二、物种选择与品系要求

    常用物种及品系

    物种推荐品系适用性优势缺陷
    大鼠雌性Wistar大鼠牛/猪Tg诱导成本低,甲状腺结构清晰,抗体应答稳定需联合高碘增强效果,炎症程度较温和
    小鼠CBA/J(高易感)、SJL/J人/鼠Tg诱导H-2k基因型易感性强,淋巴细胞浸润显著C57BL/6等低反应品系需过继转移细胞

    选择关键参数

    • 性别与年龄:优先5-6周龄雌性动物(体重120-140g),雌性激素可增强免疫应答。
    • 遗传背景
      • 高反应品系(如CBA/J)直接注射Tg即可诱导甲状腺炎。
      • 低反应品系(如C57BL/6)需依赖致敏细胞转移。

    三、模型构建操作流程

    1. 标准Tg+佐剂免疫法(以Wistar大鼠为例)

    • 材料准备
      • 抗原:牛甲状腺球蛋白(100μg/次)。
      • 佐剂:弗氏完全佐剂(CFA,初次免疫)、弗氏不完全佐剂(IFA,加强免疫)。
      • 辅助:高碘水(含碘化钠500mg/L)。
    • 操作步骤
      1. 初次免疫:CFA乳化牛Tg,足垫部皮下注射100μg。
      2. 加强免疫:第2、3、4周IFA乳化牛Tg同剂量注射。
      3. 高碘辅助:全程饮用高碘水以增强抗原性。
      4. 周期:6-8周后评估模型。

    2. 细胞转移法

    • 流程
      • 提取CBA/J小鼠脾细胞,用含mTg的培养液致敏。
      • 将致敏细胞静脉注射至同系或裸鼠受体。
    • 周期:2-3周内出现甲状腺炎症。

    3. 基因工程法

    • 操作:腺相关病毒载体携带hTg cDNA,胫骨肌肉注射(5×10⁹病毒颗粒)。

    四、模型评估标准

    核心评价指标

    1. 血清学检测
      • 甲状腺抗体:TgAb、TPOAb滴度显著升高(ELISA法)。
      • 甲状腺激素:部分模型T3/T4升高(早期炎症)或降低(晚期功能减退)。
    2. 病理学评估
      • 淋巴细胞浸润:分级标准:0级(无浸润)、1级(<10%滤泡)、2级(10-40%)、3级(>40%)。
      • 滤泡结构破坏:上皮细胞嗜酸性变、滤泡萎缩或坏死。
    3. 细胞免疫应答
      • T细胞增殖实验:检测Tg特异性T细胞反应。
      • 细胞因子谱:Th1型(IFN-γ、IL-2)主导。

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