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上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称:
甲状腺球蛋白诱导甲状腺炎模型
二、物种选择与品系要求
常用物种及品系
| 物种 | 推荐品系 | 适用性 | 优势 | 缺陷 |
|---|---|---|---|---|
| 大鼠 | 雌性Wistar大鼠 | 牛/猪Tg诱导 | 成本低,甲状腺结构清晰,抗体应答稳定 | 需联合高碘增强效果,炎症程度较温和 |
| 小鼠 | CBA/J(高易感)、SJL/J | 人/鼠Tg诱导 | H-2k基因型易感性强,淋巴细胞浸润显著 | C57BL/6等低反应品系需过继转移细胞 |
选择关键参数
- 性别与年龄:优先5-6周龄雌性动物(体重120-140g),雌性激素可增强免疫应答。
- 遗传背景:
- 高反应品系(如CBA/J)直接注射Tg即可诱导甲状腺炎。
- 低反应品系(如C57BL/6)需依赖致敏细胞转移。
三、模型构建操作流程
1. 标准Tg+佐剂免疫法(以Wistar大鼠为例)
- 材料准备:
- 抗原:牛甲状腺球蛋白(100μg/次)。
- 佐剂:弗氏完全佐剂(CFA,初次免疫)、弗氏不完全佐剂(IFA,加强免疫)。
- 辅助:高碘水(含碘化钠500mg/L)。
- 操作步骤:
- 初次免疫:CFA乳化牛Tg,足垫部皮下注射100μg。
- 加强免疫:第2、3、4周IFA乳化牛Tg同剂量注射。
- 高碘辅助:全程饮用高碘水以增强抗原性。
- 周期:6-8周后评估模型。
2. 细胞转移法
- 流程:
- 提取CBA/J小鼠脾细胞,用含mTg的培养液致敏。
- 将致敏细胞静脉注射至同系或裸鼠受体。
- 周期:2-3周内出现甲状腺炎症。
3. 基因工程法
- 操作:腺相关病毒载体携带hTg cDNA,胫骨肌肉注射(5×10⁹病毒颗粒)。
四、模型评估标准
核心评价指标
- 血清学检测:
- 甲状腺抗体:TgAb、TPOAb滴度显著升高(ELISA法)。
- 甲状腺激素:部分模型T3/T4升高(早期炎症)或降低(晚期功能减退)。
- 病理学评估:
- 淋巴细胞浸润:分级标准:0级(无浸润)、1级(<10%滤泡)、2级(10-40%)、3级(>40%)。
- 滤泡结构破坏:上皮细胞嗜酸性变、滤泡萎缩或坏死。
- 细胞免疫应答:
- T细胞增殖实验:检测Tg特异性T细胞反应。
- 细胞因子谱:Th1型(IFN-γ、IL-2)主导。
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