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文献和实验不过科研人员就没那么好运了,科研中需要用到定量PCR检测的目标广泛,不容易找到带有探针的定量检测试剂盒。当然,针对这种现状,几个大公司陆续推出探针库,比如罗氏的UPL通用探针库,就可以通过组合定量检测出人、大小鼠等7个物种的大部分ORF序列,特别适合大型实验室;ABI公司现在可以根据用户的需要提供约十二万种基因表达引物、探针和两百多万种SNP分析的引物探针进行科学研究,据说是源自于世界各地研究人员要求定制探针或者引物后汇总的结果,可惜就是贵,就连美国的实验室教授
、逆转录等原理上并无多大差异,只是采用的荧光素种类更多,这可以满足不同来源样品的平行分析。样品制备的常用试剂:对于检测表达的芯片,样品制备通常涉及(m)RNA的纯化,cDNA的合成,体外转录或者PCR,标记等步骤。而对于SNP或者突变检测,则往往涉及Genomic DNA纯化和PCR、标记等步骤。1. RNA纯化:从样品中分离纯化高质量的RNA是非常重要的第一步。由于RNA样品中的DNA碎片会影响后继的PCR反应,所以要彻底除去样品中的DNA。通常用mRNA纯化的方法可以除去DNA片断
转录、PCR、逆转录等原理上并无多大差异,只是采用的荧光素种类更多,这可以满足不同来源样品的平行分析。样品制备的常用试剂:对于检测表达的芯片,样品制备通常涉及mRNA的纯化,cDNA的合成,体外转录或者PCR,标记等步骤。而对于SNP或者突变检测,则往往涉及Genomic DNA纯化和PCR标记等步骤。1. RNA纯化:从样品中分离纯化高质量的RNA是非常重要的第一步。由于RNA样品中的DNA碎片会影响后继的PCR反应,所以要彻底除去样品中的DNA。通常用mRNA纯化的方法可以除去DNA片断
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