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ni--nta 亲和层析色谱 ni-agarose柱
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文献和实验Purification of 6xHis epitope tagged proteins by Ni-NTA-Agarose His标签蛋白纯化
Low (“Low”)Imidazole Buffer 0.5L 100mM Imidizole 3.4g 5% glycerol 25ml 100% glycerol 50mM Tris-HCl (pH 7.9)50ml 0.5M Tris-HCl (pH 7.9) 0.1% Tween-20 0.5M 100% Tween-20 500mM NaCl50ml 5M NaCl dH2O Fill to 0.5L (start w/ 350ml) High (“High
相关专题 Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合，组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后，带有组氨酸标签的蛋白特异性结合到柱子里，其他的杂蛋白流出。Ni-NTA纯化介质是Ni离子金属螯合介质。 蛋白过镍柱纯化的原理：Ni柱中的氯化镍或者硫酸镍可以与有HIs(组蛋白)标签的碱性蛋白蛋白结合，组蛋白标签一般是6个组氨酸(碱性氨基酸)。在蛋白上样后，带有组氨酸标签的蛋白特异
一、仪器设备：1.亲和层析管柱 （Bio-Rad 731-1550 Poly-Prep column, 0.8×4 cm）2.部分收集器 （另需准备干净试管约25 支）二、药品试剂：1.金属螯合亲和层析胶体（Ni-NTA agarose, QIAGEN 30210）：1 mL。在交联琼脂糖凝胶上接有nitrilotriacetic acid （NTA） 官能基，可以螯合镍离子；使用前先以镍离子饱和的。2.Buffer B-300/0（50 mM Na3PO4, pH 8.0; 0.3 M
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