即用型多聚HRP羊抗鼠/兔IgG

 

【产品名称】

通用名称：免疫显色试剂

商品名称：即用型 poly-HRP 标记羊抗鼠/兔IgG

产品货号：OST9998R

【主要组成成分】

组 分 名 称	60 测试	500 测试	1000 测试	5000测试
Poly-HRP 标记羊抗鼠/兔IgG  工作液	6ml	50ml	100ml	500ml

【预期用途】

在免疫组化反应中与首要抗原抗体结合，通过染色，将靶点进行标记。

【检测原理】

鼠源或兔源一抗与靶抗原形成复合物，再加入多聚辣根过氧化物酶标记的二抗（抗鼠）工作液，形成抗原--一抗--多聚酶标记二抗复合物，加入显色底物后，复合物中辣根过氧化物 酶催化分解显色底物形成不溶性棕黄色至褐色沉淀，在靶抗原位置沉积显色。

【储存条件及有效期】

2-8℃避光保存，避免冷冻，有效期 12 个月。

生产日期及有效期见标签。

 【操作流程】

一：检验仪器及用具

生物显微镜、移液器、计时器、孵育盒、电炉或电磁炉或微波炉、高压锅、 染色架、烤箱、盖玻片、洗瓶、EP  管或离心管等，根据各实验室的检验流程选用合适的设备器材。

二：实验步骤

1. 脱蜡

二甲苯Ⅰ 10 min → 二甲苯Ⅱ 10 min；无水乙醇 3 min×2；95%乙醇3 min；85%乙醇3 min；75%乙醇3 min；蒸馏水洗，PBS浸泡。

2. 抗原修复

柠檬酸钠修复液（pH 6.0）高温煮沸修复20 min，修复完毕，修复液中自然冷却至室温；PBS冲洗3 min×3次。

3. 阻断内源性过氧化物酶

甩干切片，组化笔沿组织画圈，滴加过氧化物酶阻断剂完全覆盖组织；室温孵育10 min；PBS冲洗3 min×3次。

4. 滴加一抗

吸干切片周围多余液体，滴加稀释好的一抗100ul；37℃孵育30 min-1h；孵育结束，PBS冲洗3 min×3次。

5. 滴加 HRP聚合物二抗

甩掉PBS，滴加HRP聚合物二抗100ul完全覆盖组织；室温/37℃湿盒孵育20-30 min；PBS冲洗3 min×3次。

6.  DAB显色

滴加100ul DAB工作液到切片上；室温显色5 min，显微镜下实时观察，阳性信号呈棕褐色，达到理想染色强度，立即用蒸馏水充分冲洗切片终止显色。

7. 苏木素复染-脱水-透明-封片。

【注意事项】

1.产品仅供科研用途，不用于临床诊断。

2.本产品仅用于免疫组化实验显色过程。

3.超过效期可能导致试剂活性降低，因此不能使用过期的产品。

4.脱蜡不彻底会影响染色结果，因此应采用经验证的合适的脱蜡过程。

5.检测过程应设置阳性和阴性对照，避免可能出现的假阳性或假阴性结果。

6.每次洗涤过程完成后应尽量除去切片上的清洗液，以免滴加试剂被稀释造成染色强度减弱，但须避免组织切片出现干片现象。 

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生产企业：南宁市奥思特科技有限责任公司