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- Thermo Fisher
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- 010-Q等(136)
- 2025年07月12日
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赛默飞 无菌无霉吸头 无菌吸头
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文献和实验细胞。4. 将管倒置1 min，以使最后残留的痕量培养液流尽。 5. 以10 ml 用冰预冷的0.1 mM CaCl2重悬每份沉淀，放于冰上 ， 4℃4000转 /分离心10 min，回收细菌细胞。 6. 每50 ml 初始培养物用2 ml 冰预冷的0.1 M CaCl2重悬每份沉定，此时，可以迅速将细胞分装成小份，液氮中冰冻，-70℃贮存备用。7. 用无菌吸头从感受态细胞悬液中取200 μl 转移到无菌的微量离心管中，加DNA或连接反应混合物（体积≤10 μl，DNA≤50 ng），轻旋以混匀内容
、注意事项 1. 浓缩的限制性内切酶可在使用前以1×限制酶缓冲液稀释，切勿用水稀释以免酶变性。 2. 购买的限制性内切酶多保存于50%甘油中，于-20℃是稳定的。进行酶切消化时，将除酶以外的所有反应成分加入后即混匀，再从-20℃冰箱中取出酶，立即放置于冰上。每次取酶时都应更换一个无菌吸头，以免酶被污染。加酶的操作尽可能快，用完后立即将酶放回-20℃冰箱。 3.尽量减少反应体积，但要确保酶体积不超过反应总体积的10%，否则酶活性将受到甘油的抑制。 4.通常延长
体(如有)作对照，采用 1-5V/cm的电压，使DNA分子从负极向正极移动，至合适位置取出置紫外灯下检测，摄片。 三、注意事项 1. 浓缩的限制性内切酶可在使用前以1×限制酶缓冲液稀释，切勿用水稀释以免酶变性。 2. 购买的限制性内切酶多保存于50%甘油中，于-20℃是稳定的。进行酶切消化时，将除酶以外的所有反应成分加入后即混匀，再从-20℃冰箱中取出酶，立即放置于冰上。每次取酶时都应更换一个无菌吸头，以免酶被污染。加酶的操作尽可能快，用完后立即将酶放回-20℃冰箱
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