犬/猫冠状病毒实时荧光 RT-PCR 检测试剂盒1

【原创】埃博拉病毒（EBOV）检测试剂盒

。 【产品研发意义】 埃博拉出血热(EHF)是由埃博拉病毒(Ebola virus，EBOV)引起的一种急性出血性传染病，发病率快，致死率高，是人类危害最严重的传染病之一，对公共卫生安全和人类的健康有很大的威胁。 到目前为止，EHF还没有有效治疗的药物和疫苗。我国尚未有检测到EBOV病毒，为了防止EBOV进入我国，建立一种快速、准确、敏感的检测方法显得尤为重要。为此，我公司研制出埃博拉病毒Z亚型核酸荧光PCR检测试剂盒、埃博拉病毒Z、S亚型双重核酸荧光PCR检测试剂盒和埃博拉病毒Z、S、B、C、R

原位PCR和原位RT-PCR操作规程

碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物，37℃，2h；e、缓冲液洗涤5min，3次；f、NBT、BCIP暗处显色，镜下控制，终止显色；g、常规脱水：透明、封固。2、原位RT-PCR步骤（1）预处理：a、蛋白酶K（0.3mg/mL） 54℃消化20min，蒸馏水洗；b、95℃加热3min，灭活残存的蛋白酶。（2）原位扩增：a、在有RNA酶抑制剂存在的条件下，用随机六聚物进行逆转录反应；b、用热启动法进行PCR扩增。标本加热至75℃时加上反应液，覆以盖玻片，四周用指甲油密封。然后将温度升至95℃，2min。再将热循环

原位聚合酶链式反应（in situ PCR）和原位反转录聚合酶链式反应（in situ RT-PCR）操作规程

5min ， 42 ℃杂交过夜。 （ 2 ）杂交后用 2×SSC 洗涤 10min ， 3 次， 1×SSC 洗涤 10min ， 3 次； （ 3 ）缓冲液洗涤 10min ， 3 次； （ 4 ）加碱性磷酸酶标记的羊抗地高辛抗体复合物， 37 ℃， 2h ； （ 5 ）缓冲液洗涤 5min ， 3 次； （ 6 ） NBT 、 BCIP 暗处显色，镜下控制，终止显色。 （ 7 ）常规脱水：透明、封固。 2 、原位 RT-PCR 步骤