犬腺病毒Ⅰ型实时荧光 PCR 检测试剂盒2

实时荧光 PCR 技术：比你想象的更丰富！

1992 年，Higuchi 在一次报告中提出了实时荧光定量 PCR 技术。通过检测溴化乙锭的含量实时监控整个 PCR 反应的进程。之后经过不断的研究，通过对 PCR 反应的数学函数关系、相应的算法以及对标准品的运用，就可以对待测样品中的目标基因进行准确定量。 1996 年 1996 年 ABI 公司推出世界上第一台定量 PCR 仪 7700 型。设备由荧光定量系统和计算机组成，通过荧光染料或荧光探针，对 PCR 产物进行标记跟踪，结合相应的软件对结果进行分析，可以实现计算待测样品

Termal Asymmetric Interlaced PCR（TAIL-PCR）

和非特异性产物(Ⅰ型和Ⅲ型)。第二次反应则将第一级反应的产物稀释1000倍作为模板，通过10次热不对称的超级循环，使特异性产物被选择地扩增，而非特异产物含量极低。第三次反应又将第二次反应的产物稀释作模板，再设置普通的PCR反应或热不对称超级循环，通过上述3次PCR反应可获得与已知序列邻近的目标序列。 Gento等曾用构建的含有潮霉素抗性基因(hph)的双元表达载体pBIG2RHPH2转化真菌，然后利用TAIL-PCR法克隆得到的真菌转化子基因组DNA的T-DNA插入区的旁侧序列并取得了成功。根据T

real-time PCR技术的原理及应用

一、实时荧光定量PCR原理（一）定义：在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 。（二）实时原理1、常规PCR技术：对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析无法对起始模板准确定量，无法对扩增反应实时检测。2、实时定量PCR技术：利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析3、如何对起始模板定量？通过Ct值和标准曲线对起始模板进行定量