BeyoDesalt™ G-25脱盐柱(Fine, 70ml

碧云天的BeyoDesalt™ G-25脱盐柱(Fine, 70ml)，即BeyoDesalt™ G-25 Desalting Column (Fine, 70ml)，是一种简单、快速、高效地使用Beyodex™ G-25 Fine (G-25 F)基质分离大分子量物质与小分子量物质的预包装即用型层析柱，俗称脱盐柱，主要用于去除蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品中的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质。本脱盐柱使用的填料为Beyodex™ G-25 Fine，填料粒径为40-140μm，可分离分子量>5kDa的蛋白质或其它大分子样品，柱床体积为70ml，建议上样量为2-20ml，本产品的功能和使用方法与Cytiva的HiPrep 26/10 Desalting基本一致，可与层析系统(如AKTA™层析系统)连接使用。

本产品采用的是Beyodex™ G-25 Fine基质，该基质是葡聚糖(Dextran)经环氧氯 丙烷交联剂通过醚键交联形成的三维网状筛孔结构的高分子聚合物，与Sephadex G-25 Fine的性能基本一致。本产品用于分离样品时，体积较大的大分子不能进入基质网状筛孔而被阻隔在基质凝胶之外，随着流动溶液沿着基质凝胶颗粒间的缝隙移动，下移速度较快，先被洗脱出柱；体积较小的分子或离子可以进入基质网状筛孔从而进入凝胶内部，随着流动溶液在凝胶颗粒的网孔内移动，因此小分子量物质在基质内停留时间更长，下移速度较慢，后被洗脱出柱，这种分离纯化方式被称为尺寸排阻层析(Size-exclusion chromatography, SEC)，也常被叫做分子筛层析(Molecular sieve chromatography, MSC)或凝胶过滤层析(Gel filtration chromatography, GFC) [1-2] (图1)。

图1. 碧云天BeyoDesalt™脱盐柱的工作原理图。

本产品的基本信息如下表:

基质(Matrix)	Beyodex™ G-25 Fine, cross-linked dextran
填料粒径(Bead size)	40-140μm
分离范围(Exclusion limit)	Mw>5kDa (Mw: molecular weight, also mentioned as Mr: relative molecular mass)
建议上样量(Recommended sample volume)	2-20ml
样品稀释倍数(Sample dilution)	1.5-5
柱床体积(Column volume, CV)	70ml
柱床尺寸(Column dimensions)	2.68×12.5cm
柱床内径(Column i.d.)	26.8mm
压力最大值(Column hardware pressure limit)	5bar (0.5MPa)
建议流速(Recommended flow rate)	5-20ml/min
最大流速(Maximum flow rate)	20ml/min
流速10ml/min时背压(Back pressure at 10ml/min)	1.5bar (0.15MPa)
化学稳定性(Chemical stability)	All commonly used buffers; Avoid oxidizing agents
pH稳定性(pH stability)	pH2-13
使用方法(Operation)	Syringe; peristaltic pump or chromatography system
保存条件(Storage)	20% ethanol at 4-30ºC

碧云天提供多种类型的脱盐柱，不同类型脱盐柱的比较和选择请参见下表：

Product Name		BeyoDesalt™
Classification		Multi Spin (96 well)	Spin	Mini	Midi	Max	Superfine	Fine
Diagram
Matrix		Beyodex™ G-25 M Beyorose™ 6FF	G-25 M 6FF	G-10 G-25 M 6FF	G-10 G-25 M 6FF	G-25 M 6FF	G-25 SF 6FF	G-25 F 6FF
Resolution		★★★					★★★★★	★★★★
Spin***	Sample volume	70-130μl		0.2-0.5ml	0.75-1.5ml	1.75-2.5ml	Not Applicable
	Elution volume	70-130μl		0.2-0.5ml	0.75-1.5ml	1.75-2.5ml
	Dilution factor	1
Gravity	Sample volume	Not Applicable		0.1-0.3ml* 0.1-0.5ml**	0.4-1ml* 0.5-1.5ml**	1-2.5ml
	Elution volume			1ml	2ml	3.5ml
	Dilution factor			2-10	1.3-3	1.5-3.5
Syringe	Sample volume	Not Applicable		Not Applicable			0.25-1.5ml	Not Applicable
	Elution volume						1-2ml
	Dilution factor						1.3-4
AKTA System	Sample volume	Not Applicable		Not Applicable			0.25-1.5ml	2-20ml
	Elution volume						1-2ml	10-30ml
	Dilution factor						1.3-4	1.5-5
Number of columns used in series		Not Applicable					1-5 columns

* Beyodex™ G-10; ** Beyodex™ G-25, Beyorose™ 6FF; *** Beyodex™ G-10 Not Applicable for Spin protocol.

碧云天提供3种基质类型的脱盐柱，不同类型基质的截留分子量(Molecular Weight Cut-off, MWCO)的比较和选择请参见下表：

Matrix	MCWO	Catalog Number
		Multi Spin	Spin	Mini	Midi	Max	Superfine	Fine
Beyodex™ G-10	>0.7kDa	/	/	P2605	P2607	/	/	/
Beyodex™ G-25	>5kDa	P2611	P2613	P2615	P2617	P2619	P2621	P2623
Beyorose™ 6FF	>400kDa	P2625	P2627	P2629	P2631	P2633	P2635	P2637

碧云天BeyoDesalt™ G-25系列脱盐柱7种型号的比较和选择请参见下表：

Serial Name	BeyoDesalt™ G-25
Classification	Multi Spin (96 well)	Spin	Mini	Midi	Max	Superfine	Fine
Cat. No.	P2611	P2613	P2615	P2617	P2619	P2621	P2623
Beads size	70-250μm					40-70μm	40-140μm
Volume of resin	500μl	500μl	2.1ml	5.3ml	8.3ml	5ml	70ml
Packed bed dimensions	/	/	0.9×6.3cm	1.3×6.6cm	1.6×8.3cm	1.6×2.5cm	2.6×18cm
Column volume	800μl	800μl	5ml	8.5ml	13.5ml	5ml	70ml
Maximum sample volume	130μl	130μl	0.5ml	1.5ml	2.5ml	1.5ml	20ml
Recovery	70-90%	70-90%	70-95%	70-95%	70-95%	95%	95%
Desalting capacity	>85%		>90%			>95%
Plate/column material	polypropylene
Storage solution	20% ethanol
Storage temperature	4-30ºC

本脱盐柱应用广泛，可以有效去除样品中的盐离子、去垢剂、小分子染料、缓冲剂等杂质。可用于对蛋白质、核酸、多肽、多糖等样品进行脱盐，完成溶液置换；去除培养基中的酚红，便于后续通过离子交换层析纯化蛋白质或核酸；去除DNA样本中的单核苷酸，便于后续DNA测序；去除样本中的小分子量标记物；通过分离大分子量物质与小分子量物质终止两者之间的反应；移除蛋白酶的产物、辅助因子或抑制剂；去除核酸标记反应中多余的放射性标记物；去除体外生物素标记反应中多余的生物素(D-Biotin)。采用AKTA™层析系统分离2.5-20ml样品的效果图参见图2。

图2. 碧云天的BeyoDesalt™ G-25脱盐柱(Fine, 70ml) (P2623)分离大分子量物质与小分子量物质的效果图。采用AKTA™层析系统，系统流速5ml/min，平衡、洗脱溶液均为10mM Tris pH7.4, 50mM NaCl，通过上样环(Loop)分别注入2.5、5、10、15和20ml样品(2mg/ml BSA in 10mM Tris pH7.4, 500mM NaCl)。实线A280nm代表紫外吸收值实时监测大分子量物质(BSA)，箭头表示BSA在1.5-4.0ml处被洗脱下来；虚线代表电导读数实时监测小分子量物质(NaCl)。实验结果显示BeyoDesalt™ G-25脱盐柱可以有效分离大分子量物质与小分子量物质。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本脱盐柱显著优于传统半透膜透析方法。①分离速度快、节省时间：脱盐柱可以5-20ml/min的高流速对样品进行快速分离，处理一个样品通常只需要5分钟，而半透膜透析至少需要6小时；②适合小体积操作、样品回收率高：脱盐柱可以有效处理2-20ml的小体积样品，回收率通常>95%，但是半透膜透析后释放样品时会有部分样品粘附在半透膜上，无法完全回收，因此不适合小体积样品；③节省溶液：半透膜透析时需要大量的缓冲液，但是脱盐柱仅需250ml缓冲液即可完成实验。

本脱盐柱具有标准1/16英寸接口，使用方便。本脱盐柱为1/16"倒锥形接口，不需要任何转接头即可适配商品化的各类中压液相纯化系统，如AKTA™层析系统等；也可使用鲁尔接口注射器(FS401-FS411)或蠕动泵，通过合适的1/16" Male/Luer Female转接头(FC005)与脱盐柱进行连接。如果没有相应的转接头不推荐连接注射器或蠕动泵使用，因为容易出现脱盐柱内部压力过高而导致进样困难甚至漏液的情况。

本脱盐柱可根据实验需求通过串联2-5根脱盐柱增加上样体积。1根脱盐柱最大可以处理20ml样品，2根本脱盐柱串联最大可以处理40ml样品，以此类推，5根本脱盐柱串联最大可以处理100ml样品。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
P2623-1pc	BeyoDesalt™ G-25脱盐柱(Fine, 70ml)	1个
P2623-5pcs	BeyoDesalt™ G-25脱盐柱(Fine, 70ml)	5个
-	说明书	1份

保存条件：

4ºC保存，两年有效。室温保存，至少一个月有效。

注意事项：

脱盐柱反复使用，可能会导致样品回收率降低。

请勿冷冻保存本产品，冻结会导致脱盐柱的基质碎裂。

保存和纯化过程中应始终保持基质湿润，避免气泡进入脱盐柱中。

由于脱盐后，样品会被稀释，所以拟脱盐的目标蛋白浓度尽量不要太低，以免脱盐后目标蛋白浓度太低不得不进行浓缩。

建议在缓冲液中加入25mM NaCl，以防止潜在的离子间相互作用。如不能使用NaCl，可以尝试加入100mM乙酸铵(NH₄Ac)或100mM碳酸氢铵(NH₄HCO₃)挥发性缓冲液。

当缓冲液中盐浓度>1M时，疏水性物质在柱子内的停留时间可能会延长或与基质结合。

当缓冲液中含有>1.5M (NH₄)₂SO₄时，脱盐柱基质可能会发生收缩。

在冷库、层析冷柜等低温条件下使用20%乙醇或其它粘稠的缓冲液时，注意保持脱盐柱的压力<0.5MPa，如果柱压过高可以通过降低流速降低柱压。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。