ELS ZETA电位检测

流式细胞仪检测线粒体膜电位

一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件，发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体膜电位崩溃，细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针，可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，两者发射光谱不同。在正常细胞内，线粒体膜电位较高，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可产生红色荧光；凋亡早期，线粒体膜电位降低，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体

流式细胞检测线粒体膜电位

rhodamine methyl ester（TMRM）等可结合到线粒体基质，其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。　　一、方法将正常培养的细胞和诱导凋亡的细胞加入使用终浓度为Rhodamine 123（1mM）或终浓度为DiOC6（25nM），JC-1（1mM），TMRM（100nM），37°C平衡30min，流式细胞计检测细胞的荧光强度。　　二、注意事项1、始终保持平衡染液中pH值的一致性，因为pH值的变化将影响膜电位。　　2、与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白，他们将与部分染料结合，降低

新型发光试剂ImmunoStar®Zeta的开发

发光信号更强，当抗体浓度没有达到最为合适的条件时，过强的信号会导致背景变得非常高，影响实验效果。因此，日本和光新开发出了ImmunoStar®Zeta。这种试剂的发光底物同样使用了L-012，但是检测灵敏度及发光信号与ImmunoStar®LD相比都有所降低。 图1：L-012和鲁米诺的发光强度的比较 在同一条件下分别在0.2nmol/l过氧化物酶里添加0.5mmol/l底物（L-012和鲁米诺），使用酶标仪对发光信号进行检测。 ImmunoStar®Zeta的特点