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产品货号:XF-SC0194
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文献和实验aspirin713 各位好,拜托大家给点建议 我最近在做FCM,主要是测药物对黑色素肿瘤细胞的生长周期的影响,用的方法是FCM PI染色的方法。 但是70%的乙醇固定之后,离心后可以看到有大量的细胞贴壁,把上清吸出去以后,可以看到沉淀留在底部,但是加入了PBS吹打均匀以后再离心。不管怎么样延长时间,或加大转速,就是没有细胞离到壁上,请问大家,这是怎么回事。应该如何避免上面这样的问题出现呢?! 干细胞之星 固定
至终浓度为500mg/ml,于4℃下密封避光保存。我们已经检测过将PI浓缩液放置数月后,并无观察到染色活性的丢失。Ⅱ、方法:将样品细胞按程序描述的方法用FITC标记的单克隆抗体进行单色染色。A、 在最后的洗涤步骤后,将样品细胞悬浮于PI缓冲液中,于4℃下密封避光保存以备通过流式细胞仪分析;B、 在最后的洗涤步骤后,如前述将样品细胞悬浮后备用。如果您想检测样品细胞活力,在每一管中加入2μl的PI浓缩液,混匀。将样品置于4℃下密封避光保存以备流式细胞仪分析。注意:此法并不适用于甲醛固定的样品
#01 什么是同型对照? 同型对照(Isotype Control),是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度,但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照? 流式抗体与靶标的结合,是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞(除T细胞外)表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体,这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合,出现非特异
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