4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸 HEPES

基本培养基的配制及细胞培养的条件

一、 培养基的特性——细胞生存的环境与条件1、温度条件（37±0.5℃）2、pH条件 （7.2～7.4）3、气体条4、水的质量（三蒸）5、渗透压6、营养条件7、无菌条件二、 培养基的分类1、平衡盐液2、天然培养基（小牛血清、胚胎液）3、合成培养基（化学成分清楚）三、 RPMI1640培养基的配制1、RPMI1640 10g2、丙酮酸钠 0.11g3、Hepes（羟乙基哌碃乙硫磺酸）5.925g4、NaHCO3 2g5、三蒸水 1000ml电磁搅拌，过滤出菌，并进行无菌实验四

细胞培养用液

，所使用的培养基就不能按照说明书所要求加入NaHCO3。此时常用5.6%或7.4%的NaHCO3溶液调节培养基，使之达到所要求的pH环境。 2.HEPES溶液：是一种弱酸，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，对细胞无毒性，主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此时可以维持pH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。 四、抗生素:常用的是青链霉素，俗称“双抗

细胞培养基中的添加剂及其作用

-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10% CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g 时，则应使用5%CO2培养细胞。 7. Hepes的作用 HEPES溶液：是一种弱酸，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了 5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加