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50 pmol
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文献和实验functions [ 16 – 18 ]. These studies demonstrated that Cas9 is a RNA-guided nuclease that is capable of binding to a targetDNA and introduce a double strand break in a sequencespecific manner, and its specifi city is determined by sequenceencoded
40 个),在 Cas9 切开双链之后,模板的两臂同源序列直接互补(HDR,同源修复),从而完成了基因编辑。聪不聪明!上传一张自己的理解图4. Clonal isolation of cell lines 将已编辑的细胞分离开来这个很好理解,在编辑片段中加入抗生素抗性基因或者荧光基因后,可通过抗生素筛选或者 FACS 分离。5. Functional testing 功能验证(1)SURVEYOR nuclease assay(2)Detection of indels or HDR
Cell Rep:上海科技大学季泉江团队开发出高效微型 CRISPR-SpaCas12f1 基因编辑系统
CRISPR-Cas 系统是目前最常用的基因编辑工具,但是由于传统的 Cas 核酸酶分子量普遍太大,使其在在体基因治疗的应用中受限。近年来,为了解决这一难题,小的 Cas 核酸酶逐渐被发现和探究。其中,Cas12f 核酸酶是目前最紧凑的 CRISPR 效应核酸酶,比传统 Cas9 和 Cas12a 核酸酶小一半以上,在临床治疗应用中具有巨大潜力,然而高效的 Cas12f 基因编辑系统仍旧较少。 2022 年 9 月 27 日,上海科技大学季泉江教授团队在 Cell Reports 发表
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