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文献和实验[资源][原创] 蛋白标签纯化技术——CBP(钙调蛋白结合肽)
如Western blotte。CBP标签层析纯化解决方案 钙调蛋白—6组氨酸—镍离子熬合介质 CBP钙调蛋白结合肽可特异性的与钙调蛋白结合,我们构建一种在N末端含有6个组氨酸标签的重组钙调蛋白,这种6个组氨酸融合钙调蛋白可与镍离子鏊合柱特意性结合,从而形成了一种能够特意性纯化CBP标签的亲合层析体系。钙调蛋白—琼脂糖介质直接与琼脂糖结合的钙调蛋白分离介质,保存于0.5 M NaCl containing 0.02% thimerosal中,1mg/ml,4% beaded agarose,2-8°C。
(hematopoietic stem cells) 和CD279 (PD-1)。 · 将孵育好的样品加入到 1 ml 的 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析柱上(柱子最大结合能力:1 x 108个细胞)。 · 当样品完全进入柱子后,加入 10 ml Buffer洗脱两次,就可以得到未结合的细胞了。后续使用流式细胞术检测富集的 NK 细胞。 (此处用到的试剂见文末) 结果与讨论 通过使用阴选将非目的细胞去除后,获得了高纯度的目的细胞群。实验用到了 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析
电泳技术(electrophoretic techniques)的应用
,结果质点的表现速度比其固有速度要快,若质点原来移向正极,表现速度比其固有速度要慢,可见应尽可能选择低电渗作用的支持物以减少电渗的影响。 三、电泳分析常用方法 (一)醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的缓冲液也少,电泳时电流的大部分由样品传导,所以分离速度快,电泳时间短,样品用量少,5μg的蛋白质可得到满意的分离
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