通用型组织固定液（中性）

FFPE 样本前处理过程及注意事项

，也是最无法补救的一步。通常选用 10% 中性缓冲福尔马林 (ph 值 7.2-7.4) 进行固定，避免酸性或无缓冲福尔马林对核酸的降解。由于手术或活检组织很可能在手术过程中就已出现血氧供应不足，因此组织需要在离体后 30 min内尽快固定。 组织标本需要充分且适度的固定，固定不足导致深处组织未接触到福尔马林而出现核酸和蛋白质降解，过度固定又会导致组织内交联严重加大核酸提取难度。组织标本厚度、福尔马林溶液的体积、固定时间是影响固定程度的三个重要因素。 福尔马林大约以 2-3 mm/24 h 的速度穿透实体

不同样本破碎和匀浆中常见问题及解决方案

FFPE 样本 FFPE 样本中的核酸在进⼊福尔马林浸泡之前就开始发⽣降解；样品基质内核酸易发⽣⽚段化、核苷酸碱基修饰以及核酸与蛋⽩的交联。 解决方案 1. 使用厚度不超过 5 mm 的组织样本，组织固定前的操作时间应当越短越好，避免 RNA 降解。 2. 不要过度固定（最多 24 h），固定时间越长，交联程度越⼤，样本中的 RNA 降解越厉害。 3. 推荐使⽤中性的福尔马林缓冲溶液及优质试剂进行石蜡包埋，不含添加剂。 4. 尽可能避免样品染色。 5. 可考虑使用专门的环保型脱蜡液，降低对实验环境

细胞凋亡检测-形态学特征的检测方法

水冲洗。 4．盐酸乙醇分化30s（提插数下）。 5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。 6．置伊红液2min。 7．常规脱水，透明，封片：95％乙醇（I）min→95％乙醇（Ⅱ）1min→100％乙醇（I）1min→100％乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3：1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min→中性树脂封固。 2）甲基绿－派诺宁染色法 1．新鲜取材组织固定液中