SweAgarose Protein A抗体纯化琼脂糖凝胶

抗体纯化

Antibody Purificatioin Purification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose (KPL)   Purifying Antibodies (Perkin-Elmer) Precipitation

【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。

[img][/img]Protein A 柱之进化 Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，能特异性地与人和哺乳动物抗体（主要是IgG）的Fc区结合。因而，将Protein A 与琼脂糖凝胶以一定的方式结合，可制备用于抗体纯化的亲和填料。 早期的Protein A柱结合的都是天然Protein A。天然Protein A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成，分子量约42KD，结构如图1所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强，可以吸附大量的lgG。但同时，天然

抗体纯化方法介绍

至少1小时以上。 利用盐析法（饱和硫酸铵沉淀法）对步骤f中透析后的上清进行纯化，具体实验见上，此处不再赘述。 3.Protein A和protein G纯化法基本原理：protein A和proteiin G 可以和抗体IgG分子的Fc段特异性结合。Protein A和protein G 作为配基可以被偶联到琼脂糖凝胶上，当抗血清从中流过时，特异性的IgG就与配基结合，其他杂蛋白则穿流而过。因两种蛋白纯化抗体时对不同宿主的抗体的结合能力不同，我们需要具体情况具体对待，分别选择protein