蛋白免染标记试剂

做了这么多的 WB，你知道化学发光和荧光可以一起检测吗？

，1小时）预处理。预处理后，在每个样品（12.8nM，15min）中加入胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）。细胞裂解，用 WB 测定 p-AKT（Ser473）的相对含量，用 No-Stain 蛋白标记试剂进行总蛋白归一化检测。 参考文献：Yi Liu,. Hydrogen Sulfide Maintains Mesenchymal Stem Cell Function and Bone Homeostasis via Regulation of Ca2+ Channel Sulfhydration

Western Blot 中的新技术、新仪器

Stain Free 免染技术源于2002 年发表在《Analytical Biochemistry》上的一篇文章。文中指出聚丙烯酰胺中的蛋白可以进行快速检测。方法是将蛋白胶浸泡在三氯乙酸或氯仿中，然后通过紫外光照射。在三氯化合物存在时，紫外光会驱使色氨酸发生反应，产物会发出可见区内的光，从而实现蛋白条带在胶上的定位。Bio-Rad 公司利用了这项技术，并在其基础上进行了二次研发，开发出了Stain Free 免染技术。 Stain Free 免染技术主要包括两个部分：Stain Free

Label-free/iTRAQ定量蛋白质组学技术

行串联质谱分析，可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。 iTRAQ技术特点： 不同样本标记之后混样，统一处理上机，减少了分别上机造成的实验误差，并利用同位素标签的丰度来检测，定量更准确，重复性更好； 由于需要标记试剂标记，因此成本相对较高； 通量高，在一次实验中最多可同时比较8个样品； 利用基于同一个参考样品的办法，可以进行多于8个样品的定量比较； iTRAQ的覆盖度高、灵敏度高。 Label-Free定量蛋白质组学分析 Label-Free定量，即非标记的定量蛋白