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- gemig
- XF-S1245
- 2025年07月08日
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500 µL
产品规格：500 µL
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文献和实验【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍？
nvonne 我购买的miRNA mimic 带FAM标记，本打算用流式检测转染效率，但发现荧光信号很弱，转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化，相对定量分析，发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍，这虽然表明转染mimic成功，但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是？也没查到相关文献，谁能给我一些参考？非常感谢 zhujoker 顺转就是这么高，我的也是这样，有的能够上调1000倍
引物对所有的靶位点不产生十分稳定一致的结果，建议使用15nt的随机引物2. oligo-dT：只能用于mRNA完整的样品，特别有polyA .而且对于一些特殊的变异体以及较长的3’UTR的区域比较困难3. 特异引物：最特异最灵敏的方法。特别RNA量足够情况下建议使用此法。PCR 优化PCR优化主要有：1. 引物的浓度2. 建议使用SYBR Green I和EvaGreen 进行扩增和溶解曲线的测试笔者建议的操作流程I．靶的选择和试验设计1. 针对目的基因序列选择合适的扩增片断查看以下三个网站是否
大家都在说 qRT-PCR 实验原理、引物设计、结果解读等，而我觉得我应该和大家分享一下 qRT-PCR 的实验操作事项。虽小，但是关乎结果。在做 qRT-PCR 之前，我们需要对自己的 RNA 以及操作方法有清楚的了解，毕竟我们的努力是希望得到结果的，而不是简单的练练手。所以在做 qRT-PCR 之前，我们需要确定以下问题（部分内容仅适用于 SYBR）。你确定你的 RNA 没有降解吗？NanoDrop 2000 只能检测 RNA 的浓度以及纯度，而对于 RNA 的完整性是没法检测的。RNA
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