HBSS缓冲液（无钙镁，无酚红）

细胞分离技术

1. 从原代组织中分离细胞 将组织块分离（散）成细胞悬液的方法有多种，最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短，以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织，获得较高产量的有活性细胞。 （1）胰蛋白酶 (Trypsin) ●在去除不需要的组织后，使用无菌的解剖刀和剪子把剩余的组织切成3~4 mm小片，通过悬浮在无钙镁的平衡盐溶液中清洗组织碎片。让组织碎片沉淀，去除上清

人外周血中性粒细胞制备

(1)Percoll：将购买的Percoll(Pharmacia)用10×HBSS(无钙、镁)按9:1的体积比配成储备液，该浓度被认为100%。再用1×HBSS(含10mmol/L HEPES,pH7.2)将100%的Percoll稀释成81%、70%、55%的浓度备用，其密度分别为1.100、1.0875和1.0697。 (2)葡聚糖：将Dextran T-500 用PBS配成4%的浓度。 (3)离心梯度的配制：取将5ml 81%的Percoll加入17×100mm的离心管底，然后依次加入3ml 70

HBSS的配制和使用攻略

相关专题 在众多实验缓冲液中，HBSS显得有点默默无名。HBSS主要用于培养液的配制或清洗细胞，不能单独使用。本文介绍HBSS的配制和使用方法。 HBSS，即汉克斯平衡盐。英文全名Hank's Balanced Salt Solution。D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为：8 g/L NaCl， 0.4 g/L KCl