Hieff Unicon® Fast Multiplex O

Hieff Unicon® Fast Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus)是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作，本产品含有UDG酶，可有效防止气溶胶污染的风险。

本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer，Enzymes Mix等，缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子，能够保证引物扩增效率的同时，进行多达四重的反应。

逆转录和定量PCR在同一管中进行，操作简便。

-25~-15℃保存，有效期2年。

组分信息

【注】a. 4×HU® MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。本组分含有dNTP和dUTP。

b. HU® Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase和UDG酶。

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

使用说明

1. 反应体系（以25 μL为例）

【注】使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。

a). 引物浓度：Primer Mix 中包含多对引物，通常每条引物终浓度可以根据情况在 0.1-1.0 μM 间进行调整。

b). 探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。

c). 模板稀释：qPCR灵敏度极高，建议将模板进行稀释使用，控制Ct值在20-35之间适宜。

d). 反应体系：推荐使用25 μL或50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

e). 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头；避免交叉污染和气溶胶污染。

2. 参考扩增程序

2.1 标准程序

【注】a. 扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。

b. 荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。

2.2 快速程序

【注】c. 快速程序：实际使用的qPCR检测仪器是否支持快速扩增，请进行预实验确认。

3. 适用机型

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；

Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；

Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；

Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR; SLAN 96S, 96P.

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。