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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
常温/干冰
- 细胞形态:
成纤维细胞样,短梭形
- 物种来源:
小鼠
- 规格:
1×10⁶cells
B16-F0 小鼠黑色素瘤细胞
产品编号:CL-203m
细胞特性
形态:成纤维细胞样,短梭形,贴壁生长
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶x1(常温运输)/ 2mL冻存管x2(干冰运输)
用途:仅供科研使用
培养基及培养冻存条件准备
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完全培养基 |
90%RPMI-1640 + 10%热灭活胎牛血清 |
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培养条件 |
37℃,5%CO2 |
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冻存液 |
50%基础培养基 + 40%FBS + 10%DMSO |
收货须知
收货当天发现异常,请在24小时内及时联系客服,逾期视为收货良好!
冻存管形式:收货后及时置于-80℃冰箱保存,若长时间不使用,应过夜转移至液氮。
T25形式:收货后于培养箱中静置2-3h,再对细胞进行常规操作。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
细胞复苏、传代、冻存操作
(一)细胞复苏
① 冻存管从液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速没入 37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以 1 min内全部溶解为宜;
② 在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有 9mL 完全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心 5 min,弃去上清液,用 1-2mL 完全培养基重悬细胞;
③ 然后将细胞悬液加入到含有 5-6mL 完全培养基的 T25 瓶中,放入培养箱培养。
(二)细胞传代
① 将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 1-2mL 胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);
② 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入 5-6 mL完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散;
③ 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的 T25 瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;
④ 注意培养基 PH 值变化和细胞密度,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%-90%时,重复第 1 项操作或者冻存。
注意事项:
① 细胞具有密度依赖性,首次传代(密度达到 80%),建议 1:2 传代(保持细胞密度),且优先在 T25 瓶中。
② 密封培养瓶的话,处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松。
复活性:可复活,培养18h后观察细胞贴壁,72h密度达到80%。
| CL-061r | CTX-TNA2 大鼠脑I型星形胶质细胞 |
| CL-062r | CIA-FLS 大鼠膝关节成纤维滑膜细胞 |
| CL-063r | 永生化大鼠肺动脉平滑肌细胞 |
| CL-064r | 永生化大鼠膝关节滑膜成纤维细胞 |
| CL-065r | 永生化大鼠子宫平滑肌细胞 |
| CL-066r | NRK 正常大鼠肾细胞 |
| CL-067r | MMQ 大鼠垂体瘤细胞 |
| CL-068r | SHZ-88 大鼠乳腺癌细胞 |
| CL-002m | MLE-12 小鼠肺上皮细胞 |
| CL-003m | H22 小鼠肝癌细胞 |
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