Oxoid 克氏双糖铁琼脂CM1173B,三糖铁琼脂CM11

 

Oxoid 克氏双糖铁琼脂CM1173B,三糖铁琼脂CM1186B,柠檬酸琼脂CM0155B,赖氨酸脱梭酶肉汤CM0308S等

 

一些肠杆菌的鉴定培养基，包括:
克氏双糖铁琼脂  CM1173B，原货号CM0033B
三糖铁琼脂  CM1186B，原货号CM0277B
Simmons柠檬酸琼脂，也称枸橘酸盐琼脂,CM0155B
赖氨酸脱梭酶肉汤片剂  CM0308S
SIM培养基  CM0435B
MRVP培养基 CM0043B
干粉培养基10-30℃保存，制成培养基2-8℃保存

克氏双糖铁琼脂，三糖铁琼脂，Simmons柠檬酸琼脂 

三款肠杆菌的鉴别培养基

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM1173B CM0033B	克氏双糖铁琼脂 Kliger Iron  Agar 基于双糖发酵及硫化qing产生的肠杆菌鉴定培养基	500g	9.1L
CM1186B CM0277B	三糖铁琼脂 Triple Sugar Iron  Agar 通过三糖发酵和硫化qing产生区分肠杆菌的复合培养基	500g	7.7L
CM0155B	Simmons 柠檬酸琼脂 Simmons Citrate Agar 柠檬酸国内也称枸橘酸，因此也称枸橘酸盐琼脂，用于区分肠杆菌	500g	21.7L

克氏双糖铁琼脂 CM1173(CM0033)  KIA培养基

配方表：

成分*	含量 g/L
Lab-Lemco粉(牛肉浸粉)	3.0
酵母粉	3.0
蛋白胨	20.0
氯化钠	5.0
乳糖	10.0
葡萄糖	1.0
柠檬酸铁	0.3
硫代硫酸钠	0.3
酚红	0.05
琼脂	12.0
pH 7.4±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：    

取55g培养基至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解，混匀倒入容器中，121℃高压灭菌15分钟，分装到试管中，形成1英寸深的斜面。

产品描述：

Oxoid的克氏双糖铁琼脂，含有2种糖，柠檬酸铁作为产生硫化qing的指示剂。这种培养基可以用来鉴定从平板培养基如麦康凯琼脂，亚硫酸铋琼脂，脱氧胆酸盐柠檬酸琼脂等上分离出来的肠杆菌。

技术方法：

从固体培养基上取菌落，在克氏双糖铁琼脂表面涂布，并刺穿表面进斜面底部。培养后会产生三种反应：

1、碳水化合物的利用

斜面表面反应	斜面内部反应
产酸：黄色	产酸：黄色
产碱：红色	产碱：红色

2、产气作用

产气：琼脂有裂痕；不产气：无气体产生。

3、硫化qing的产生

底部全部或者部分变黑。

培养后观察斜面培养基：

红色表面/黄色底部   仅发酵葡萄糖
黄色表面/黄色底部   葡萄糖+乳糖发酵
红色表面/红色底部   即不发酵葡萄糖，也不发酵乳糖           

Reactions after 18 - 24 hours at 35°C

V = variable, + = positive, - = negative.

制成培养基：红色凝胶，2-8℃保存。

注意事项：

必须在18-24小时内检测克氏双糖铁的反应，提前或者延迟读取数据将得到错误的结果。

KIA培养基上微生物会产生氧化反应和发酵反应，如果不小心区分这两种反应，会产生混淆。

使用直的接种针来接种，避免对琼脂内部重复刺破。

必须进行纯培养，以避免混淆。

不用用旋盖试管来培养KIA，空气需要自由地与试管内进行气体交换。

三糖铁琼脂 CM1186(CM0277)  

配方表：

成分*	含量 g/L
Lab-Lemco粉(牛肉浸粉)	3.0
酵母粉	3.0
蛋白胨	20.0
氯化钠	5.0
乳糖	10.0
蔗糖	10.0
葡萄糖	1.0
柠檬酸铁	0.3
硫代硫酸钠	0.3
酚红	0.024
琼脂	12.0
pH 7.4±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：   

取65g培养基至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解，混匀倒入容器中，121℃高压灭菌15分钟，分装到试管中，形成1英寸深的斜面。

产品描述：

三糖铁琼脂是一种通过发酵葡萄糖、乳糖、蔗糖的能力，产生硫化qing的能力，来区分肠杆菌的鉴别培养基。 

三糖铁琼脂除了表现克氏双糖铁琼脂的功能外，其中的蔗糖能识别和排除蔗糖发酵菌。这种微生物会在培养期间缓慢发酵乳糖或者完全不发酵乳糖，但是会与蔗糖迅速反应。某些变形杆菌和其他菌属会产生和沙门及志贺氏菌相似的结果，需要通过水解尿素的功能做进一步区分，在这种情况下，三糖铁琼脂需要与尿素肉汤或尿素琼脂一起使用。

三糖铁琼脂上的典型菌落：

菌株	斜面Slant	底部Buty	产气	产酸
大肠杆菌ATCC8739	产碱黄色	产酸黄色	+	-
变形杆菌ATCC13315	产酸黄色	产酸黄色	+	+
铜绿假单胞菌ATCC9*027	产碱红色	产碱红色	-	-
肠炎沙门氏菌ATCC13076	产碱红色	产碱红色	+	+

Simmons柠檬酸琼脂 CM0115 

配方表：

成分*	含量 g/L
硫酸镁	0.2
磷酸二氢铵	0.2
磷酸胺钠	0.8
柠檬酸钠，三价	2.0
氯化钠	5.0
溴百里酚蓝	0.08
琼脂	15.0
pH 7.0±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：   

取23g培养基至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解，混匀倒入容器中，121℃高压灭菌15分钟 

产品描述：

Simmons柠檬酸琼脂是一种肠杆菌科细菌的鉴别培养基，通过是否将柠檬酸作为唯一碳源来利用进行鉴别。

斜面或者培养皿上培养都可以，35℃培养48小时。阳性反应使培养基从绿色变为亮蓝色，阴性反应培养基不变色。

大肠杆菌（包括导致流行性婴儿肠炎的），耶尔森氏菌，志贺氏菌，爱德华氏菌在这款培养基上不生长。粘质沙雷氏jun和主要的肠杆菌，柠檬酸杆菌，克雷伯氏菌，变形杆菌和普罗威登氏菌可以利用柠檬酸，产生阳性反应。

Simmons柠檬酸琼脂可以用来区分柠檬酸阳性的肠炎沙门氏菌和一些沙门氏菌II, III and IV亚属，及柠檬酸阴性的伤寒沙门氏jun，甲型副伤寒沙门氏jun，鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏jun。

注意事项：

不在在培养基表面覆盖任何营养物质，否则会导致假阳性。接种前在生理盐水中进行稀释，避免将其他碳源带入培养基中。

赖氨酸脱梭酶肉汤片剂(Taylor改良配方)

用于区分肠杆菌，每片可配5ml培养基，储存于2-8℃

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM0308S	赖氨酸脱梭酶肉汤片剂 Lysine Decarboxylase Broth Tablets(Taylor modificaton)	100片	0.5L

配方表：

成分*	含量 g/L
酵母粉	3.0
葡萄糖	1.0
L-赖氨酸	5.0
溴百里酚蓝	0.016
pH 6.1±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法： 

取1片CM0308S至5ml蒸馏水中，置于合适的容器中，121℃高压灭菌15分钟。

产品描述：

赖氨酸脱梭酶肉汤是一种通过特定的生化反应用来区分沙门氏菌和某些其他肠杆菌的鉴定培养基 。 

在培养的初始阶段，微生物通过葡萄糖的发酵，产酸，使培养基颜色变黄，进一步培养后，如果赖氨酸发生脱羧，将会有碱性反应，颜色变为紫色（阳性），如果颜色仍然是黄色，则是阴性。

35℃培养24小时

制成培养基为蓝灰色，2-8℃保存

注意事项：

使用少量接种到赖氨酸培养基中；

注意甲型副伤寒沙门氏jun是阴性反应；

在少于24小时培养的情况下不要读取结果，某些微生物需要延长培养时间最多到4天才能读数。

SIM培养基

检测肠杆菌的运动性和吲哚、硫化物产生来区分肠杆菌

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM0435B	SIM培养基 SIM Medium	500g	16.7L

配方表：

成分*	含量 g/L
胰蛋白胨	20.0
蛋白胨	6.1
硫酸亚铁铵	0.2
硫代硫酸钠	0.2
琼脂	3.5
pH 7.3±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

制备方法： 

取30G培养基至1L蒸馏水中，煮沸至完全溶解，分装至合适的最终容器中，121℃高压灭菌15分钟。

MRVP培养基(Clarks and Lubs培养基)

通过甲基红和V-P实验区分大肠产气菌群的葡萄糖-磷酸盐培养基

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM0043B	MRVP培养基(Clarks and Lubs培养基) MRVP Medium(Clarks and Lubs Medium)	500g	29.4L

配方表：

成分*	含量 g/L
蛋白胨	7.0
葡萄糖	5.0
磷酸盐缓冲液	5.0
pH 6.9±0.2

*可根据操作标准自行调整配方 

制备方法： 

取17G培养基至1L蒸馏水中，混匀，分装至合适的最终容器中，121℃高压灭菌15分钟。

产品描述：

这种葡萄糖-磷酸盐培养基可用来做Methyl-red and Voges-Proskauer tests 甲基红和V-P实验，来区分产气大肠菌群。