Oxoid EE肉汤CM03170B,肠杆菌增菌肉汤CM11

Oxoid EE肉汤CM03170B,肠杆菌增菌肉汤CM1115B,BGLB CM1176B,远藤氏琼脂CM0479B等

 

一些大肠菌群分离培养基：
EE肉汤 CM0317B，新货号CM1170B
肠杆菌增菌肉汤 CM1115B
煌绿2%胆盐肉汤（BGLB） CM1176B，原货号CM0031B
乳糖肉汤 CM0137B，新货号CM1161B
中国蓝乳糖琼脂  CM0209B
远藤氏琼脂  CM0479B
如无特殊说明，干粉培养基10-30℃保存，制成培养基2-8℃保存

EE肉汤 肠杆菌增菌肉汤

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM1170B CM0317B	EE肉汤(缓冲葡萄糖煌绿胆盐肉汤)  EE Broth(Bufferde Glucose Brilliant Green Bile Broth) 耐胆盐革兰氏阴性菌的增菌培养基	500g	11.5L
CM1115B	肠杆菌增菌肉汤-Mossel（EP/USP/JP/BP） Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel(EP/USP/JP/BP) 药品微生物检测中用于培养耐胆盐革兰氏阴性菌的增菌培养	500g	19.2L

EE肉汤 CM1170，原货号CM0317

配方表：

成分*	含量 g/L
蛋白胨	10.0
葡萄糖	5.0
无水磷酸氢二钠	6.45
磷酸二氢钾	2.0
精制牛胆汁Ox Bile purified	20.0
煌绿Brilliant green	0.0135
pH 7.2±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：

添加43.5g 培养基至1L 蒸馏水中，煮沸至培养基完全溶解，将每100mL 培养基分装至250mL 锥形瓶中，100℃加热30 分钟后，用流动的自来水使其快速冷却。此培养基为热敏感型，禁止对其进行高压灭菌。

产品描述：

EE肉汤可作为食品和动物饲料中的肠杆菌的增菌培养基，它比其他的非选择性培养基（比如甘露醇肉汤，乳糖肉汤）对非肠杆菌的抑制性更强，以为它的配方里面有胆盐和煌绿。

肠杆菌的计数在对食品和药品的卫生质量监测中至关重要，但是其实验结果的可靠性取决于受损细胞的复苏情况。这种弱化的细胞可能缘于暴露在脱水环境，低pH值，或其他不利条件中。

技术参考：

1、将1：10稀释的食品样品在胰蛋白胨大豆肉汤CM0129中25℃培养2-8小时，以复苏弱化的细胞。容器内液体层的深度不能超过1厘米，用顺时针和逆时针交替的方法持续摇晃试管30秒，连续做三次；

2、在必要的复苏之后，加入10倍体积的EE肉汤到复苏的悬浮液中；

3、用上述的方法摇匀。对于更大的样品，需要把加有样品的复苏培养基，加入相同体积的双倍强度EE肉汤中。

4、44℃，18小时培养嗜热菌。32℃，24-48小时培养嗜温菌。嗜冷菌根据肠杆菌科的要求4℃培养10天。

5、查看试管中的肉汤，看看是否浑浊，寻找一些黄绿色的颜色变化，推定有肠杆菌。

6、可以在VRBGA培养基CM0485上再培养，或者用含有乳糖的培养基上培养，确定是乳糖发酵菌还是非乳糖发酵菌。如需鉴定，需要进一步的实验来确定。

肠杆菌增菌肉汤-Mossel CM1115

配方表：

成分*	含量 g/L
明胶的胰酶消化物	10.0
无水葡萄糖	4.5
胆盐	3.055
磷酸二氢钾	2.0
无水磷酸氢二钠	6.4
煌绿Brilliant green	0.015
pH 7.2±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方,4.5g无水葡萄糖相当于5.0g葡萄糖一水化合物；

3.055g胆盐相当于20.0g脱水牛胆汁；6.4g无水磷酸氢二钠相当于二水磷酸氢二钠

制备方法：

将25.97g 溶于1 升蒸馏水中。混匀，将100ml 装入250ml 容量瓶中。利用流动的100℃蒸汽加热30分钟( Heat the medium at 100°C using free flowing steam for 30 minutes only)。用冷水迅速冷去，切勿高压。 

产品描述：

肠杆菌增菌肉汤-Mossel 是药品中耐胆盐革兰氏阴性菌的增菌培养基。可用于定性或者定量检测。肠杆菌增菌肉汤-Mossel 解决了耐胆汁盐阴性菌的抑制问题。纯化的牛胆汁解决了这个问题，并且初步试验可用于检测几乎每个活菌的生长。肠杆菌增菌肉汤-Mossel 作为富集培养基需与紫红胆盐葡萄琼脂结合使用。

外观：
干粉培养基：浅绿色，干粉
在用培养基：绿色液体

煌绿2%胆盐肉汤（煌绿乳糖胆盐肉汤，BGLB） 

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM1176B CM0031B	煌绿2%胆盐肉汤(煌绿乳糖胆盐肉汤，BGLB) Brilliant Green Bile 2% Broth 用于检测并确认大肠菌群，推荐用于大肠杆菌44℃确认实验	500g	12.5L

配方表：

成分*	含量 g/L
蛋白胨	10.0
乳糖	10.0
牛胆粉（精制）	20.0
煌绿	0.0133
pH 7.4±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：

添加40g 培养基至1L 蒸馏水中，使其充分混匀分装至装有杜氏发酵管的容器中，121℃高压灭菌15min。
不可对双强度的培养基进行高压灭菌，另一种替代方式是将培养基置于100℃条件下加热30min 使其溶解。  

产品描述：

这款培养基用于检测或计数产气大肠菌群，其中的煌绿抑制厌氧乳糖发酵，比如产气荚膜梭菌。这款培养基还能用于44℃大肠埃希氏菌的确认实验。

其中的胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌，而产气大肠菌群通过快速的乳糖发酵的产气结果被检出。

重要的是，培养基中的抑制剂要和营养物质及矿物质的成分达到平衡，这样梭菌和芽孢杆菌不会反映出假阳性结果，及产气结果。

BGLB用于水，乳品和食品分析中。配方符合GB和SN标准。

在BGLB中加入4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷酸（MUG）,Oxoid货号BR0071E，可以促进大肠埃希氏菌的检测。

外观：
干粉培养基：淡绿色，呈干粉状。
制成培养基：绿色溶液。

注意事项：
不可对双强度培养基进行高压灭菌。
如培养基中的胆汁/煌绿含量由于食品样品的影响而导致降低，革兰氏阳性芽孢菌也可能产气。

乳糖肉汤（Lactose Broth） 

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM1161B CM0137B	乳糖肉汤，Lactose Broth 用于对牛奶或水等样品中的假定的大肠菌群进行性能确认的液体培养基，符合APHA标准。	500g	38.5L

配方表

成分*	含量 g/L
Lab-Lemco powder(牛肉浸粉)	3.0
蛋白胨	5.0
乳糖	5.0
pH 6.9±0.2 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：

添加13g培养基到1L蒸馏水中， 分装到乳糖发酵管（杜氏发酵管）中，121℃高压灭菌15分钟。

产品描述：

含有乳糖肉汤的试管加入稀释后的样品后，35℃培养，24小时和48小时后检查是否有产气反映。假定其中有大肠菌群的反应的话，需要利用后续的实验来确定。

注意：

确保乳糖发酵管在接种前没有气泡；

更大的水样品需要双倍量的乳糖肉汤，以降低最终的培养体积。不要对双倍量的乳糖肉汤过度加热，不然会产生抑制产物。

中国蓝乳糖琼脂（China Blue Lactose Agar） 

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM0209B	中国蓝乳糖琼脂 China Blue Lactose Agar 于对牛奶中的细菌进行计数和分离的非抑制性培养基	500g	14.3L

配方表：

成分*	含量 g/L
Lab-Lemco powder(牛肉浸粉)	3.0
蛋白胨	5.0
乳糖	10.0
氯化钠	5.0
中国蓝	q.s.
琼脂	12.0

*可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：

添加35g 培养基至1L 蒸馏水中，煮沸使基完全溶解，121℃高压灭菌15min。

外观
干粉培养基：秸秆/淡蓝色，呈干粉状。
制成培养基：蓝色凝胶状。

注意事项
革兰氏阳性和阴性球菌和杆菌可在该培养基中生长。使用该培养基前请先确认微生物的形态及其革兰氏染色反应结果。 

远藤氏琼脂 Endo Agar

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM0479B	远藤氏琼脂基础 Endo Agar Base APHA推荐用于确认大肠菌群，可加品红BR0050A	500g	13.9L
BR0050A	基础品红指示剂 Basic Fuchsin Indicator	10g
MM0551B	滤膜法远藤氏琼脂LES Membrane Endo Agar LES 用于滤膜法，加品红BR0050A后，对水中的大肠菌群进行计数，通过两步增菌方法	500g	11.1L

远藤氏琼脂 CM0479

配方表：

成分*	含量 g/L
蛋白胨	10.0
乳糖	10.0
二磷酸钾	3.5
亚硫酸钠	2.5
琼脂	10.0
pH 7.5±0.2 @25℃

 *可根据操作标准自行调整配方 

 

制备方法：

添加36g 培养基至1L 蒸馏水中，加入6ml 的10% w/v品红指示剂溶液BR0050（50:50 的乙醇/水），煮沸至其完全溶解，121℃高压灭菌15 分钟。混匀后浇注。需将培养基避光保存以保持其淡粉色。

碱性品红是一种潜在的致癌物质，应注意避免粉状燃料的吸入及皮肤接触污染。

产品描述：

远藤氏琼脂是一种历史悠久的培养基，最初是用来分离伤寒杆菌。这款培养基的功能后来得到更加有用的补充，现在用于肠道微生物中乳糖发酵菌和非乳糖发酵菌的区分，尤其是在大肠菌群的推定实验中起确认作用。有乳糖发酵微生物产生的酸和气，比如大肠埃希氏菌，引起菌落的特定的红色反映，以及周围培养基的变化。

为确认液体培养基的推定实验，将产气或者产酸产气的试管里面的培养基再接种到远藤氏琼脂上，35℃培养24小时。

乳糖发酵菌（比如大肠埃希氏菌）会产生深红色菌落，并影响周围培养基的颜色，周围有一个金色光泽的颜色。

非乳糖发酵菌形成无色透明菌落，对应粉色至无色的培养基。

滤膜法远藤氏琼脂 MM0551

配方表：

成分*	含量 g/L
酵母提取粉	1.2
蛋白胨	3.7
蛋白胨 P	3.7
胰蛋白胨	7.5
乳糖	9.4
二磷酸钾	3.3
磷酸二氢钾	1.0
氯化钠	3.7
去氧胆酸钠	0.1
月桂基硫酸钠	0.05
亚硫酸钠	1.6
琼脂	10.0
pH 7.2±0.2

*可根据操作标准自行调整配方 ，Basic Fuchsin to be added at 1.2 gm/litre.

 

制备方法：

称取42g培养基至1L蒸馏水中，加入12ml 10% w/v的基础品红溶液，缓慢摇晃加热至煮沸，不能高压灭菌，冷却至45℃，分装至50-60mm的培养皿中，每个皿4ml，对于更大的培养皿，加的培养基高度大约在1.5mm。

配好的培养基需要避光储存。在冰箱中最多存放两周时间。

无机盐改良谷氨酸盐培养基 Minerals Modified Glutamate Medium

货号	产品描述	规格	可配制培养基
CM0607G	无机盐改良谷氨酸盐琼脂基础加谷氨酸钠  Endo Agar Base Minerals Modified Glutamate Medium Base plus Sodium Glutamate 用于水中大肠菌群的计数（两者包装在一起）	500g+300g	22.0L

配方表：

成分*	含量 g/L
乳糖	20.0
甲酸钠	0.5
L-胱氨酸	0.04
L-(-)天冬氨酸	0.048
L-(+)精氨酸	0.04
硫胺素	0.002
烟酸	0.002
泛酸	0.002
7水合硫酸镁	0.200
柠檬酸铁铵	0.020
2水合氯化钙	0.020
磷酸氢二钾	1.80
溴甲fen紫	0.020
pH 6.7±0.1 @25℃

*可根据操作标准自行调整配方