- ￥290
- 玺拓基因(Theta-gene)
- 广州
- C2116
- 2026年04月01日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80 ℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
EPI400 competent cells
- 库存：
9
- 供应商：
玺拓基因
- 规格：
10×100μl
感受态细胞名称：EPI400 competent cells；EPI400感受态细胞
转化效率：1~5 × 107 cfu/µg pUC19
基因型：F-mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80dlacZΔM15ΔlacX74recA1endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697galUgalKλ-rpsL (StrR)nupGtrfAtonA pcnB4 dhfr
抗性：链霉素
用途：诱导型高拷贝质粒菌株
特点和简介
- EPI400菌株来源于EC100菌株，将EC100核基因中可以提高质粒拷贝数的pcnB基因删除后插入一个诱导型启动子驱动的pcnB基因从而构建成EPI100菌株。非诱导情况下，EPI400菌株中的质粒拷贝数低，特别适合于克隆和扩增含有不稳定DNA或毒性基因的质粒；在加入WDEPI诱导剂I后可以提高质粒拷贝数到正常状态；
- mcrA, Δ(mrr hsdRMS mcrBC)基因型使EPI400菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA；
- rec A1和end A1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取；
- lacZΔM15标记的存在使EPI400可用于蓝白斑筛选，ton A赋予其抗噬菌体T1和T5的能力，rpsL赋予其链霉素抗性。
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文献和实验一步实现单拷贝到高拷贝的转换－－Copy Control克隆技术（附图）
表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。 二、CopyControl克隆和克隆诱导步骤（图2）： 图1 图2 将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。 转化感受态细胞（TransforMax EPI300
一步实现单拷贝到高拷贝的转换---CopyControl克隆技术
1 CopyControl 克隆 和 克隆 诱导步骤（图2）： 将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。 转化感受态细胞（TransforMax EPI300 E.coli），涂皿，在氯霉素LB培养基上筛选。在这种条件下，trfA基因的表达被抑制， 克隆 以单拷贝数量生长。 挑选 克隆
【共享】CopyControl克隆技术：一步法实现单拷贝到高拷贝
E.coli.这是一个工程菌株，含有受诱导启动子严谨控制的trf A基因，在诱导表达的条件下可以提供启动oriV所需要的trf A基因产物。另外phage T1-resistant TransforMax EPI300-T1R E.Coli也可提供这个基因的产物。CopyControl克隆和克隆诱导步骤：将目标DNA片断连接到已经线性化、去磷酸化的CopyControl pCC1 Vector上。转化感受态细胞（TransforMax EPI300 E.coli），涂皿，在氯霉素LB培养基上筛选。在这种
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