SIRP-α/CD172a His Tag蛋白, Rat

Rat SIRPα/CD172a-His Tag Protein (UA010780)——高纯度重组蛋白，赋能大鼠模型中的免疫与神经科学研究

在免疫调控、神经发育及疾病机制研究领域，信号调节蛋白α（Signal Regulatory Protein α, SIRPα）/CD172a作为关键免疫检查点分子，通过与CD47的相互作用，在巨噬细胞吞噬、神经元突触形成及炎症信号传导中发挥核心作用。斯达特生物推出的Rat SIRPα/CD172a-His Tag Protein (UA010780)，以高纯度、高活性及功能化His标签设计，为大鼠模型研究提供精准工具，助力解析SIRPα在免疫应答与神经生物学中的复杂功能。

一、核心技术：大鼠源重组SIRPα-His标签蛋白
1. 蛋白设计与表达系统

• 基因来源与结构域：基于大鼠SIRPα（Accession号P97710）的胞外结构域（Lys32-Asn373），融合C端His标签，构建SIRPα-His重组蛋白。
• 表达系统：采用HEK293细胞瞬时转染技术，确保蛋白糖基化修饰与天然构象高度一致，分子量约为60-85 kDa（含His标签）。
• 标签设计：C端融合His标签，支持IMAC亲和层析纯化，并兼容ELISA、SPR等下游检测，同时保留SIRPα与CD47的结合活性。

2. 蛋白纯化与质控

• 纯化工艺：通过Ni-NTA亲和层析与分子筛层析两步法纯化，去除内毒素（<1 EU/μg）与宿主蛋白残留（<0.1%），纯度>95%（SDS-PAGE验证）。
• 活性验证：通过SPR技术测定SIRPα-His与重组大鼠CD47-Fc蛋白的结合亲和力（KD值<10⁻⁸ M），并通过ELISA检测EC50值，确保功能完整性。
• 稳定性测试：在-20℃条件下保存12个月，活性损失<5%；复溶后4℃保存1周内活性稳定。

3. 蛋白形态与储存

• 性状：无菌冻干粉，复溶后为澄清透明溶液，缓冲体系为PBS（pH 7.4），含5%海藻糖保护剂。
• 储存条件：收到蛋白后，建议分装为10 μg/管，-80℃长期保存；避免反复冻融，复溶后4℃保存不超过7天。
• 复溶建议：使用无菌去离子水或PBS（pH 7.4）复溶至≥100 μg/mL，轻柔混匀，避免剧烈振荡。

二、应用场景：大鼠模型中的免疫调控与神经发育研究
1. 肿瘤免疫逃逸机制研究

• 巨噬细胞吞噬抑制：在Sprague-Dawley大鼠巨噬细胞（NR8383）模型中，通过SIRPα-His阻断CD47-SIRPα信号轴，观察巨噬细胞对Walker 256肉瘤细胞的吞噬效率变化，解析“别吃我”信号在肿瘤免疫逃逸中的作用。
• 树突状细胞成熟抑制：在大鼠骨髓来源的树突状细胞（BMDC）中，通过SIRPα-His干预，结合流式细胞术检测CD80、CD86等共刺激分子表达，验证SIRPα对DC成熟的负调控作用。
• 抗肿瘤免疫治疗：在Wistar大鼠肝癌模型中，通过尾静脉注射SIRPα-His，结合抗PD-1抗体，观察肿瘤生长抑制率与生存期延长效果，评估其在联合免疫治疗中的潜力。

2. 神经发育与突触功能研究

• 神经元粘附与突触生长：在大鼠原代海马神经元培养体系中，添加SIRPα-His，通过免疫荧光染色检测神经突长度与分支数量，结合βIII-Tubulin标记，解析SIRPα在神经元发育中的作用。
• 胶质细胞附着与迁移：在大鼠星形胶质细胞（Astrocyte）迁移实验中，通过Transwell小室检测SIRPα-His对胶质细胞迁移速率的影响，结合GFAP染色，评估其在神经损伤修复中的功能。
• 突触可塑性调控：在急性大鼠脑片或离体海马神经元中，通过SIRPα-His干预，结合全细胞膜片钳记录，检测长时程增强（LTP）或长时程抑制（LTD）的诱导效率，解析其在突触可塑性中的作用。

3. 氧化应激与炎症信号传导

• ROS信号通路激活：在大鼠巨噬细胞（NR8383）中，通过LPS刺激诱导氧化应激，添加SIRPα-His后检测NADPH氧化酶活性（DHE染色）与ROS水平（DCFH-DA荧光探针），验证SIRPα在ROS信号传导中的调控作用。
• 炎症因子表达抑制：在LPS诱导的大鼠腹膜炎模型中，通过SIRPα-His干预，结合qPCR检测TNF-α、IL-6等炎症因子mRNA水平，解析其对炎症信号通路的负调控机制。
• 抗病毒免疫调节：在大鼠流感病毒感染模型中，通过SIRPα-His阻断CD47-SIRPα信号，检测病毒载量与肺组织病理变化，评估其在抗病毒免疫中的作用。

4. 蛋白质相互作用与信号网络

• PTPN6/PTPN11招募验证：在HEK293T细胞中，通过Co-IP实验检测SIRPα-His与PTPN6（SHP-1）、PTPN11（SHP-2）的相互作用，结合Western blot验证其作为对接蛋白的功能。
• 受体酪氨酸激酶偶联反应：在A431表皮样癌细胞（过表达大鼠EGFR）中，通过EGF刺激诱导EGFR磷酸化，添加SIRPα-His后检测下游AKT、ERK1/2的磷酸化水平，解析其对RTK信号通路的负调控作用。
• THBS1信号传导：在大鼠成纤维细胞（NRK-49F）中，通过THBS1刺激诱导ROS产生，添加SIRPα-His后检测NADPH氧化酶活性，验证其在THBS1信号通路中的作用。

三、品质承诺：全流程质控与技术支持
1. 严格质控体系

• 纯度验证：每批次蛋白均通过SDS-PAGE、SEC-HPLC检测，确保纯度>95%，并提供电泳图谱与色谱报告。
• 活性验证：通过SPR、ELISA及细胞功能实验（如吞噬抑制、ROS检测）三重验证，确保蛋白生物学活性符合预期。
• 批次一致性：通过ELISA检测不同批次蛋白与CD47的结合活性，批间差异CV值<10%。

2. 技术支持与实验方案

• 实验方案优化：提供SIRPα-His在ELISA、SPR、Western blot等实验中的详细操作指南，支持用户快速上手。
• 多平台验证：蛋白已通过SPR、ELISA、细胞功能实验等多平台验证，确保其在不同实验场景下的可靠性。
• 售后服务：提供免费的技术咨询与实验指导，针对实验失败案例提供免费复检或补发服务。

3. 兼容性与稳定性

• 缓冲体系兼容性：蛋白储存缓冲液兼容多种下游实验（如ELISA、SPR、Western blot），无需额外透析。
• 长期稳定性：-80℃保存条件下，蛋白活性可维持1年以上；复溶后4℃保存1周内活性损失<5%。

关于斯达特(Starter)，国产抗体专家：
杭州斯达特(www.starter-bio.com)志在为全球生命科学行业提供优质的抗体、蛋白、试剂盒等产品及研发服务。依托多个开发平台：重组免单抗、重组鼠单抗、快速鼠单抗，重组蛋白开发平台 (E.coli,CHO,HEK293,InsectCells)，已正式通过欧盟98/79/EC认证ISO9001认证ISO13485.