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优爱
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25μg/100μg/500μg
| 规格: | 25μg | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100μg | 产品价格: | ¥2000.0 |
| 规格: | 500μg | 产品价格: | ¥8400.0 |
Human SIRPα/CD172a-His Tag Protein (UA011144)——高纯度重组蛋白,推动人类免疫与神经科学研究
在深入探索人类免疫系统与神经生物学机制的征程中,信号调节蛋白α(Signal Regulatory Protein α, SIRPα)/CD172a凭借其作为关键免疫检查点分子的独特地位,通过与CD47的精密相互作用,在调节巨噬细胞吞噬功能、促进神经元突触形成及调控炎症信号传导等方面发挥着不可替代的作用。斯达特生物精心研发的Human SIRPα/CD172a-His Tag Protein (UA011144),以其卓越的纯度、高活性及巧妙设计的His标签,为人类疾病模型研究提供了强有力的工具,助力科研人员深入解析SIRPα在免疫应答与神经生物学中的复杂功能。
一、核心技术:人类源重组SIRPα-His标签蛋白
1. 蛋白设计与表达系统
- 基因来源与结构域:Human SIRPα/CD172a-His Tag Protein基于人类SIRPα(Accession号ATD50864.1)的胞外结构域(Glu31-Arg369)精心设计,并巧妙融合C端His标签,构建出SIRPα-His重组蛋白。这一设计不仅保留了SIRPα的天然活性,还极大地便利了后续的纯化与检测过程。
- 表达系统:采用HEK293细胞瞬时转染技术,确保了蛋白糖基化修饰与天然构象的高度一致性,分子量精确控制在43-60 kDa(含His标签),为后续研究提供了可靠的基础。
- 标签设计:C端融合的His标签,不仅支持IMAC亲和层析纯化,还使得该蛋白能够轻松兼容ELISA、SPR等下游检测技术,同时保持SIRPα与CD47的结合活性,为科研人员提供了极大的便利。
2. 蛋白纯化与质控
- 纯化工艺:通过Ni-NTA亲和层析与分子筛层析两步法纯化,有效去除了内毒素(<1 EU/μg)与宿主蛋白残留(<0.1%),确保了蛋白的高纯度(>95%,经SDS-PAGE与SEC-HPLC双重验证)。
- 活性验证:利用SPR技术精确测定SIRPα-His与重组人类CD47-Fc蛋白的结合亲和力(KD值<10⁻⁸ M),并通过ELISA检测EC50值,全面验证了蛋白的功能完整性。
- 稳定性测试:在-20℃条件下保存12个月,活性损失控制在<5%以内;复溶后4℃保存1周内,活性依然保持稳定,为长期研究提供了可靠的保障。
3. 蛋白形态与储存
- 性状:该蛋白以无菌冻干粉形式提供,复溶后为澄清透明溶液,缓冲体系为PBS(pH 7.4),并特别添加了5%海藻糖作为保护剂,有效提升了蛋白的稳定性。
- 储存条件:收到蛋白后,建议分装为10 μg/管,于-80℃条件下长期保存;为避免反复冻融对蛋白活性的影响,复溶后应在4℃条件下保存,且保存时间不超过7天。
- 复溶建议:使用无菌去离子水或PBS(pH 7.4)进行复溶,浓度应≥100 μg/mL,复溶过程中应轻柔混匀,避免剧烈振荡。
二、应用场景:人类疾病模型中的免疫调控与神经发育研究
1. 肿瘤免疫治疗研究
- 巨噬细胞吞噬调控:在人类巨噬细胞模型中,通过SIRPα-His阻断CD47-SIRPα信号轴,观察巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬效率变化,为解析“别吃我”信号在肿瘤免疫逃逸中的作用提供有力证据。
- 树突状细胞成熟与功能:在人类骨髓来源的树突状细胞中,通过SIRPα-His干预,结合流式细胞术检测共刺激分子表达,验证SIRPα对DC成熟的负调控作用,为肿瘤免疫治疗提供新的思路。
- 联合免疫治疗:在人类肿瘤异种移植模型中,通过尾静脉注射SIRPα-His,结合抗PD-1抗体等免疫检查点抑制剂,观察肿瘤生长抑制率与生存期延长效果,评估其在联合免疫治疗中的潜力。
2. 神经发育与神经退行性疾病研究
- 神经元粘附与突触生长:在人类原代神经元培养体系中,添加SIRPα-His,通过免疫荧光染色检测神经突长度与分支数量,解析SIRPα在神经元发育与突触形成中的作用。
- 胶质细胞功能:在人类星形胶质细胞迁移实验中,通过Transwell小室检测SIRPα-His对胶质细胞迁移速率的影响,评估其在神经损伤修复与神经退行性疾病中的功能。
- 突触可塑性调控:在人类神经元或脑片模型中,通过SIRPα-His干预,结合电生理记录技术,检测长时程增强(LTP)或长时程抑制(LTD)的诱导效率,解析其在突触可塑性调控中的作用。
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文献和实验下调不能说明活性降低,因为决定GSK3-beta的活性的还与其磷酸化的比例和磷酸化的位点有关。所以你除了要做GSK3-beta总的蛋白表达之外,还要做磷酸化的GSK3-beta的蛋白表达。 (2)应该活性形式和非活性形式都做。一般来讲,GSK3-beta在Ser9位点磷酸化之后活性收到抑制,而在216位点磷酸化之后,其活性收到加强。因此建议将GSK3-beta的两个磷酸化位点都做了,另外还要同时检测GSK3-beta的总蛋白表达,这样才能全面的说明问题。
,2F12;CRIS-3 Leu LFA-1(gp180/95)的α链 与ICAM-1(CD54)和ICAM-2(CD102)结合 CD11b Mol,OKM1; (Mac-1,CR3,integrin αm G,M,NK gp165/95的α链 C3bi和FB受体,与ICAM-1结合,粘附,调理吞噬 CD11c LeuM5;(CR4,integrin αx) M,G,NK,Tsub gp150/95的α链 C3bi受体,调理吞噬
中性肽链内切酶,水解脑啡肽、趋化肽和P物质 CD11a MHM24,2F12;CRIS-3 Leu LFA-1(gp180/95)的α链 与ICAM-1(CD54)和ICAM-2(CD102)结合 CD11b Mol,OKM1; (Mac-1,CR
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