B-27神经细胞添加剂（50×），不含抗氧化剂

类器官培养与应用——肠类器官

、在立体显微镜下，可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体，并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。   中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后，将微量离心管垂直放置在管架上 10min，此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清，控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻，添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml)，Noggin (终浓度100

类器官培养与应用——肝类器官

- - - - - - 10nM 10nM 10nM   hEGF - - - - - - 50ng/ml 50ng/ml 50ng/ml C029 hHGF - - - - - 10ng/ml 25ng/ml 25ng/ml 25ng/ml CJ72 B-27 - - - 1% 1% - 1× 1× 1×   A83-01

细胞增殖和细胞毒性（CCK-8法）原理和经验总结

定OD值，可向每孔中加入10 μL 0.1 M HCl溶液或者1%（W/V）SDS溶液，并遮盖培养板避光室温保存。在24小时内吸光度不会发生变化。 7．结果分析： A．细胞存活率：将各测试孔的OD值减去本底OD值（空白组），各重复孔的OD值取平均数±SD。 细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100%。 B．求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。 五、经验总结 1．种板数：通过文献确认，看实验所用细胞别人是否做过，找出大致范围