华韵/ 人外周血淋巴细胞完全培养基，HYPC4535

人外周血单细胞悬液制备流程及注意事项

。如果直接倒掉，离心管内会有残留裂解液，后续加入100 μL PBS重悬细胞时，可能不能完全稀释裂解液，导致红细胞裂解过度。 6. 细胞沉淀重悬，可用枪轻轻吹打，或者用转速小的涡旋仪涡旋。 7. 人血样本建议染CD45，有利于后续数据分析时圈门。 8. 处理人血样本时，推荐设置只染CD45的单染管低速上机用来设置阈值，观察细胞量，圈淋巴细胞群。 9. 人外周血中主要含T淋巴细胞，B淋巴细胞的量较少。如果使用病人的血液样本，B淋巴细胞的量可能更少，因此B淋巴细胞的检测不推荐使用过夜的样本，过夜样本易导致

Ficoll密度梯度离心法提取PBMC原理及注意事项

Healthcare Life Sciences #17 - 1440 - 02) RPMI 1640 培养基（Invitrogen） 胎牛血清（FBS）（GIBCO） 双抗 P/S（Penicillin/ Streptomycin) (GIBCO) 二甲亚砜（DMSO）（SIGMA） 预先装好异丙醇的冻存盒 2. 方法/步骤 配制所需的溶液： a. 细胞培养基：RPMI 1640 + 10% FBS+ 1% P/S； b. 细胞冻存液：FBS 中加入 10%DMSO； （1）在离心管中加入淋巴细胞

检测细胞增殖，你的方法用对了吗？

液：用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液（1000×）RPMI 1640 完全培养基：RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏，研磨成单细胞悬液，用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞，将细胞过 40 μm 细胞滤网后，进行细胞计数。样本清洗液洗涤（可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替），1 500 rpm 离心 5 min，用 PBS 重悬，调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE