786-O-YFP

一文搞清蛋白质相互作用的研究方法

2【四】荧光能量共振转移，fluorescence resonance energy transfer(FRET)，这个技术与第三条又有所不同。人们将目标蛋白 A 与青色荧光蛋白 CFP 融合表达，将 A 的可能的互作蛋白 B 与黄色荧光蛋白 YFP 融合表达，CFP 的激发光是波长是 414nm 紫外光区域，而荧光波长是 475nm 蓝光区域，恰好 YFP 的激发光是 475nm 附近蓝光区域，而荧光则是 525nm 附近黄色光区域。如果 AB 两蛋白相互作用。空间上相互接近，导致 CFP

基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂

时效率最高 [2，3] 。在设计钙变色子时，用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团：蓝绿色荧光蛋白作为给体，而黄色荧光蛋白作为受体（见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴，分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用，而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质，分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念，钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的，前后融合的 CaM 的 N

Confocal Microendoscopy of Neuromuscular Synapses in Living Mice

Thy1.2‐YFP16 or thy1.2‐YFPH transgenic mice (Jackson Labs) Vetergesic (buprenorphine 4.2 µg/ml)