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文献和实验0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)
12.0 18.0 8.05 10.0 11.0
融合蛋白的慢病毒载体转导人 GBM 细胞系 U87 MG 和小鼠高级别胶质瘤细胞系 GL261,结果显示病毒载体转导对胶质瘤细胞的增殖率没有显著影响,表达 Akaluc 的细胞比表达 Fluc 的细胞的 BLI 信号强大约 10 倍。 颅内移植表达 Akaluc 的胶质瘤细胞产生超过 Fluc 100 倍的 BLI 信号。将 GL261-Venus-Akaluc 和 GL261-MSCV-Fluc 胶质瘤细胞颅内植入到同系的 C57BL/6 小鼠中,在所有时间点,Venus-Akaluc 组
表达,以此来进行选择最后的融合位置。 表 1. 常用荧光蛋白特性 荧光素酶 荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称,其中主要有萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase,FLuc)和海肾荧光素酶(Renilla luciferase,RLuc)。荧光素酶报告系统非常灵敏,可以高效地检测基因的表达和细胞的活动情况,是分析转录因子与启动子活性、miRNA 与靶基因相互作用以及活体成像等的有效方法。 萤火虫荧光素酶(FLuc):FLuc 的底物是荧光素,催化
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