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48T
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
Human免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA Kit
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
Human免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA Kit5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验,或者 λ 链)。 Anti-IgG (H+L) 抗体比只抗片段的抗体识别更多的抗原表位,适合普通的免疫检查过程。 Anti-IgG , Fc/ Fc γ fragment specific 这类抗体和 IgG 重链的 Fc 部分反应。它们通过 ELISA 检测,和 / 或针对 Fab 片段吸附测试。某些情况下,这类抗体需要额外检测和 / 或吸收处理来降低 IgM 和 或 IgA 的交叉反应。在这种情况下( 抗人,抗鼠和抗大鼠 ),抗体标有“抗 IgG ( Fc γ )”,表示
感染的诊断价值。因此,在临床实验室,一定要使用要求对标本做1:1000稀释的试剂盒进行检验,从而保证相应检测项目结果的可靠性及临床应用价值。 (2)改变酶标抗体:由于RF结合的是IgG的Fc片段,如果将待酶标的抗体的F,片段酶切夫除,仅留下具有特异结合功能的F(ab’)2部分标记酶,则在测定中即可避免RF的干扰。 (3)标本中RF用变性IgG预先封闭:将经热变性(63℃,10min)的动物如兔、羊等的IgG加入到标本稀释液中,或是将该变性IgG连接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔
性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu)链。① 木瓜酶裂解部位 ② 胃蛋白酶裂解部位重链和轻链的N端的氨基酸排列顺序因各种抗体而异,称为可变区,分别用VH和VL表示。两者构成抗体的抗原结合部位,只与相应的抗原决定簇匹配,发生特异性结合,是抗体专一性结合抗原的结构基础。IgG可被木瓜蛋白酶分解为三个区段,其中两个相同的区段称抗原结合片段(Fab)。每个Fab都保存结合抗原的能力,但只有一个抗原结合位点,是单价的,与抗原结合后不出现凝集或沉淀。另一区段称Fc段,无抗体
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