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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
KP-4
- 库存:
999
- 供应商:
厦门逸漠生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
详询
- 细胞类型:
详询
- 品系:
详询
- 组织来源:
胰腺肿瘤腹水转移
- 相关疾病:
详询
- 物种来源:
人源
- 免疫类型:
详询
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
详询
- 器官来源:
人源
- 运输方式:
常温T25瓶运输或冻存发货
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1x106cells/T25或1mL冻存管
背景介绍
从50岁日本籍男性患有胰腺肿瘤腹水转移建立的分泌甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)的人肿瘤细胞系。可移植到裸鼠身上。
KP-4人胰腺癌细胞产品基本信息
细胞名称:KP-4人胰腺癌细胞
种属来源:人
组织来源:胰腺肿瘤腹水转移
细胞形态:上皮细胞样
生长特性:贴壁生长
培养基:1640+10%FBS+1%P/S
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2至1:3,每周 3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
KP-4人胰腺癌细胞培养操作
KP-4人胰腺癌细胞复苏步骤
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
KP-4人胰腺癌细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml,T75瓶2-3ml),使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加3-4ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
KP-4人胰腺癌细胞冻存步骤
待KP-4细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到KP-4细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。.观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6.该KP-4人细胞仅供科研使用。
7. 说备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议1:2传代 。
8. 注意: 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。




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