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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
LAPC4
- 库存:
999
- 供应商:
厦门逸漠生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
-
- 细胞类型:
-
- 品系:
-
- 组织来源:
前列腺癌;淋巴结转移
- 相关疾病:
-
- 物种来源:
人源
- 免疫类型:
--
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
-
- 器官来源:
前列腺
- 运输方式:
常温T25瓶运输或冻存发货
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1x106cells/T25或1mL冻存管
LAPC-4人前列腺癌细胞产品基本信息
细胞名称:LAPC-4,人前列腺癌细胞
种属来源:人
组织来源:前列腺
细胞形态:上皮细胞样
生长特性:半贴壁半悬浮生长
培养基::1640+10% FBS+PS
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2至1:3,每周 3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
STR位点:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D3S1358:15,17;D5S818:11,13;D7S820:10,10.3,11;D8S1179:13;D13S317:9,10,11,12;D16S539:9;D18S51:14,15,22;D21S11:28,30;FGA:21,22;TH01:6,9.3;TPOX:8;vWA:15,16
细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
LAPC-4人前列腺癌细胞培养操作
LAPC-4人前列腺癌细胞复苏步骤
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
LAPC-4人前列腺癌细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a、收集细胞培养上清:抽出瓶中的培养基和悬浮的细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清,细胞重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
b、剩下贴壁的细胞,用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1次。
c、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml,T75瓶2-3ml),使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,加少量培养基终止消化。
d、按3mL/瓶补加培养基,轻轻打匀吹下细胞后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
e、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养中。(第一次传代建议一个满的T25传一个10cm或者2个T25)。
LAPC-4人前列腺癌细胞冻存步骤
待LAPC-4细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心5 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到LAPC-4细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6. 该LAPC-4细胞仅供科研使用。
7. 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代 。
8.注意: 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
悬浮细胞收货注意事项:
1、收货时需镜下拍照(看密度、状态)
2、静置后需镜下拍照(看整体密度)
a.如密度50%以下,建议换液并竖瓶培养
b.如密度50%-80%,建议换液培养,隔天观察密度
c.如密度90%,建议传代
3、换液及传代处理前,培养瓶竖着放置至少半小时(使细胞沉到瓶底);收集上清,必须将瓶内所有培养基(70ml)全部收集!并用PBS(10ml)润洗瓶底并收集!离心转速为1000rpm,5min。




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