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48T
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
Human免疫球蛋白G Fc段结合蛋白(FcγBP)ELISA Kit
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
Human免疫球蛋白G Fc段结合蛋白(FcγBP)ELISA Kit5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验决定簇(antigenic determinant),或称为表位(epitope)。一个抗原分子可带有不同的决定簇。二、抗体(一)抗体的结构抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE.与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM.Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma
ELISA技术中的抗原与抗体的反应抗体1.抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五类,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。与免疫测定有关的Ig主要为IgG和IgM。Ig由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig的轻链是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)两种型别。五类Ig的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG和IgM的重链分别称为γ(gamma)链和μ(mu)链。 ① 木瓜酶裂解部位 ② 胃蛋白酶裂解部位
,或者 λ 链)。 Anti-IgG (H+L) 抗体比只抗片段的抗体识别更多的抗原表位,适合普通的免疫检查过程。 Anti-IgG , Fc/ Fc γ fragment specific 这类抗体和 IgG 重链的 Fc 部分反应。它们通过 ELISA 检测,和 / 或针对 Fab 片段吸附测试。某些情况下,这类抗体需要额外检测和 / 或吸收处理来降低 IgM 和 或 IgA 的交叉反应。在这种情况下( 抗人,抗鼠和抗大鼠 ),抗体标有“抗 IgG ( Fc γ )”,表示
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