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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFP40805
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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越多的应用于单克隆抗体的纯化,最早的单克隆抗体多为鼠源,而现在兔源性单克隆抗体因为亲和力高,更加广泛的被诊断试剂领域采用。而蛋白A纯化柱已经广泛的深入到上述两种单克隆抗体的常规纯化,同理,上述纯化产生的各种单克隆抗体可以用于ELISA,金标试纸条的组装,病理诊断试剂。表1 不同物种来源的抗体与蛋白A亲和力* 物种与蛋白A亲和力人++++兔++++鼠++豚鼠+++马++猪+++*Kronvall et al. (1970
) 100 mmol/L 乙酸钠缓冲液,pH 5.5。 ( 12 ) 来源于猪胃黏膜的胃蛋白酶 A ( Sigma Aldrich ) 。 ( 13 ) N-糖酰胺酶 A : 来源于甜杏仁油的 N-糖酰胺酶 A (Roche Applied Science)( 保存于一25~一15°C) 。 ( 14 ) 去糖基化酶试剂盒(Prozyme, San Leandro, CA ) ( 保存于 4℃)。 2.3 被糖基化的蛋白在哪里 ( 1 ) 50 mmol/L
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