Porcine硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)ELISAki

再熬夜就真「傻」了！新研究发现，熬夜会降低大脑「排毒」效率，增加痴呆风险……

相关的蛋白质。硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和硫酸软骨素蛋白聚糖（CSPG）生物合成酶的水平随着昼夜节律波动。 图片来源：PLOS Genetics Aβ42 节律性吞噬作用受 HSPGs 水平的调节 已有研究报道 Aβ42 吞噬作用和 PG 水平之间存在反向关系，以及 HSPGs 对 Aβ42 吞噬作用的抑制作用。因此，研究者假设 HSPGs 的节律性振荡可能会抑制 Aβ42 的吞噬作用。 为了验证这一假设，研究者分别纯化了肝素酶 I、II 和 III，利用其混合液剪切所有形

内皮细胞免疫沉淀法制备硫酸蛋白多糖

磺酰氟（PMSF 1 M，1 μl）+1×NET 0.5 ml+抗体（抗HSPG 2 μg/mg 细胞蛋白质裂解物） ↓ 在4℃孵育3小时或过夜 ↓ 加50 μl 蛋白G琼脂糖凝胶（5~10% in HBS），振荡2~3小时 ↓ 沉淀免疫复合物，混合物在室温下6500 rpm离心1分钟，用冰冷的1×NET洗沉淀物3次，弃去上清 ↓ 加50 μl 样品缓冲液至沉淀物中，加热100℃4分钟，在冰上迅速冷却，10000 rpm 离心1分钟。 ↓ 5%SDS-PAGE跑胶

脑室灌注β-淀粉样肽致痴呆动物模型

性小胶质细胞和星形胶质细胞增生,为避免注射位点附近的大量Aβ聚集和复杂的注射损伤的影响,采用可溶性Aβ1～40侧脑室注射联用转化生长因子β(transforming growth factor ,TGFβ) 的方法建立痴呆大鼠模型,结果发现,模型大鼠学习记忆能力明显下降,海马和皮层ACh 含量降低,ChAT 活性降低,AChE 活性升高,胆碱能功能受损[ 14 ] ,并证实TGFβ和Aβ注射后可出现大量硫黄素染色阳性的弥散性Aβ沉积[ 15 ] , TGFβ介导的细胞外基质蛋白- 硫酸乙酰肝素蛋白多糖