- ￥6250
- 华韵生物(Huayunbio)
- HYPC2442
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式：
常温/干冰
- 规格：
T25/瓶
| 名称 | PUMC-HUVEC-T1 (SV40T转化人脐静脉内皮细胞) (STR鉴定正确) |
| 种属 | 人 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 生长培养基 | Complete culture medium for PUMC-HUVEC-T1 |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
| 推荐传代比例 | 1:2-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 注意事项 | 1、该细胞为有限传代细胞系，请注意代次控制； 2、该细胞培养难度较高，建议使用专用培养基。 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
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文献和实验lmnsmu PCR产物酶切后做克隆难度较大，可能与酶切后目的基因的量有关，而且你的片段相对大； 我的建议是：将纯化的PCR产物先与T载体相连构建T_A克隆（一般的Taq酶PCR扩增后两端会形成A），然后鉴定T载体中目的基因是否正确；若插入正确，培养细菌提取重组的T克隆进行酶切得到目的基因，然后再与相应的酶切质粒连接。另外目的基因与质粒的比例3:1~10:1，目的基因的量应该大些。 祝好运！ robustandy
DNA 样品，将未甲基化的胞嘧啶（C）转化为尿嘧啶（U）。重亚硫酸盐处理不会影响甲基化的胞嘧啶（m5C） 。为了检测甲基化位点，一对引物经设计带有鸟嘌呤（G），可与目标序列中的 m5C 配对；为了检测未甲基化位点，另一对引物带有腺嘌呤（A），可与重亚硫酸盐转化分子中的U配对（随后，与后续 PCR 循环中的胸腺嘧啶（T）配对）。通过引物配对得到的阳性 PCR 扩增结果可用于确定位点的甲基化状态（图 7）。 图 7.甲基化特异性 PCR 第一步，使用重亚硫酸盐处理 DNA 样品，将未甲基化的胞嘧啶转化
载体了，也双酶切回收了目的片段进行连接。转化长了8个菌落，扩增后碱法小提质粒，双切结果却是在2000多和1000那有两条带，很奇怪啊 zitong1983 wangch84 wrote: tozitong1983最新进展，终于将4kb片段连到宝生物t载体了，也双酶切回收了目的片段进行连接。转化长了8个菌落，扩增后碱法小提质粒，双切结果却是在2000多和1000那有两条带，很奇怪啊 先确认T载体上的连接是成功的（酶切鉴定
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