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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式:
常温/干冰
- 规格:
T25/瓶
人表皮成纤维细胞
Cat NO.: CP-H183
1.产品名称:人表皮成纤维细胞
2.组织来源:皮肤组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
人表皮成纤维细胞分离自皮肤组织;皮肤组织来源包括头部、脸部、手、脚、腿、背部、腹部、包皮等体表部位皮肤,可依据需求选用;表皮位于动物皮肤的外层,由胚胎时期外胚层形成,具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构,由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层,即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
5.方法简介:
华韵实验室分离的人表皮成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
6.质量检测:
华韵实验室分离的人表皮成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
| 包被条件 | |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 产品货号 | CM-H183 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
人表皮成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用华韵配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
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文献和实验丁香园网友hyong915的观点为:成纤维细胞培养(一) 原代培养1、在手术室无菌条件下,切取新鲜的皮肤,增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织,修除表皮和皮下组织,盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内,Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液,眼科剪反复剪切组织块成0.5-1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上,组织块间留约0.3-0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞,放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
min。6、洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。7、标记性抗体:加入荧光标记抗体,37℃孵育30min。洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。8、封片:封片剂封片。9、镜检:荧光显微镜下观察。六、注意事项1、选材注意时要将皮肤组织上的被毛去除干净,也可以使用还未长出被毛的乳鼠进行试验。2、注意尽量将皮片剪成(3-5)mm ×(10-15)mm大小,如太大则不利于消化,太小则不利于真皮、表皮的物理分离。3、过度消化损伤严重影响成纤维细胞
网络 五、皮肤的再生 皮肤受损伤后,其再生过程和修复时间,因受损的面积和深度而有很大的差别。小而浅的损伤,由于表皮细胞的迁移和增殖,数天就能愈合,也不形成瘢痕。较大而深的损伤,其再生过程则较长。创伤后首先是凝血和止血,并出现炎症反应,众多的中性粒细胞进入局部,清除细菌。随后出现许多巨噬细胞,清除损坏的组织,并释放几种生物活性物质促进成纤维细胞增殖和毛细
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