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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式:
常温/干冰
- 规格:
T25/瓶
人真皮成纤维细胞
Cat NO.: CP-H103
1.产品名称:人真皮成纤维细胞
2.组织来源:皮肤组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
人真皮成纤维细胞分离自皮肤组织内的真皮层;皮肤组织来源包括头部、脸部、手、脚、腿、背部、腹部、包皮等体表部位皮肤,可依据需求选用;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的真皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。真皮成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
5.方法简介:
华韵实验室分离的人真皮成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
6.质量检测:
华韵实验室分离的人真皮成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
| 包被条件 | |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 产品货号 | CM-H103 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
人真皮成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用华韵配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
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文献和实验实验材料: 1. 正常动物皮肤 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 细胞培养瓶(T25) 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 实验方法: 1. 取正常动物皮肤,置于小培养皿内,用PBS漂洗3-4次,以除去表面血污及毛发; 2. 将洗净的组织用眼科剪剪切成1mm3 左右大小,再用PBS漂洗3次; 3. 用眼科剪将组织块移至培养瓶瓶壁
美少女福音!Science 重磅报道,他们率先实现皮肤无疤痕愈合
增殖的可能。 图片来源:Science 随后,作者也通过标记位于皮肤不同位置的 ENFs,识别出了是位于皮肤深处真皮网状层的 ENFs 被激活产生了 EPFs。 图片来源:Science 在弄清楚 EPFs 的来源后,研究团队探究了是什么导致 ENFs 被激活产生了 EPFs。 由于存在于纤维组织中并负责纤维的改造与产生,成纤维细胞能够感受到纤维组织的力学特性,所以作者认为是受伤后皮肤力学性质的改变,导致了 EPFs 的激活。 通过在不同刚度的模拟组织中培养 ENFs 以及使用抑制剂阻断力学信号
min。6、洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。7、标记性抗体:加入荧光标记抗体,37℃孵育30min。洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。8、封片:封片剂封片。9、镜检:荧光显微镜下观察。六、注意事项1、选材注意时要将皮肤组织上的被毛去除干净,也可以使用还未长出被毛的乳鼠进行试验。2、注意尽量将皮片剪成(3-5)mm ×(10-15)mm大小,如太大则不利于消化,太小则不利于真皮、表皮的物理分离。3、过度消化损伤严重影响成纤维细胞
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