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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFC81492
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验特异性的引物PCR扩增。基因经过30-35个循环的一轮PCR扩增。50μl PCR扩增产物中的15μl在1.2%E-Gel®琼脂糖凝胶电泳检测,在紫外光下观察。 泳道1:HPRT(次黄嘌呤磷酸核糖转移酶),1.3kb,30拷贝/细胞 泳道2:SMAP(胸腺激素受体共激活蛋白),3.1kb 泳道3:Cleavage and polyadenylation specificity factor,4.5kb 泳道4:TFRC(转铁蛋白受体),5.0kb 泳道5:IGFⅡR(类胰岛素生长因子Ⅱ受体
休克性冷冻,将提取物储存在-80℃。3.1.2组织中提取物的制备: —测定端粒酶活性的组织标本准备,需要小心的采样并保存临床材料,因为肿瘤细胞的污染可产生正常组织中的假阳性信号,而由于不恰当的保存也可在肿瘤样本中产生阴性信号。如不是立即用于端粒酶PCR ELISA组织样本应以小片在液氮中休克性冷冻,并保存在-80℃。 —冰上孵育30分钟。 —2-8℃,16000g离心细胞裂解液20分钟。可用冷冻台式离心机及离心管。 —小心将上清液移入新的离心管中,确保无组织残片被带入,我们建议仅抽提175μ
GAD抗体,脑脊液中也有此抗体合成;大约5%的SPS患者是副瘤性的,多数和抗Amphiphysin 抗体相关。 抗胰岛细胞/抗谷氨酸脱羧酶抗体检测试剂盒(间接免疫荧光法): 欧蒙公司的生物薄片技术通过间接免疫荧光法可同时检测抗胰岛细胞抗体和抗GAD抗体。小脑抗GAD抗体的检测不仅可对 I 型糖尿病进行早期诊断、确认高风险人群以及对病程进行监控;还可提示SPS。抗胰岛细胞抗体和抗GAD抗体与胰腺内分泌部反应,一方面有利于准确诊断 I 型糖尿病,另一方面可以揭示风险人群临床前的自身免
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