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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
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96T
产品货号:XFC81149
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验CFTR Folding Consortium: Methods Available for Studies of CFTR Folding and Correction
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3 分线外挣扎的你,看别人如何登顶 Nature、Science
。2016 年 Science:Airway acidification initiates host defense abnormalities in cystic fibrosis mice.气道酸化启动了 CF 小鼠宿主防御的异常。疾病介绍囊性纤维化(cysticfibrosis,CF),一种影响外分泌腺的遗传病,源于跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR) 的基因发生突变,CFTR 是负责 HCO3
产物CFTR是有害的。细胞中正确位置正常形态的囊性纤维化跨膜传导调节因子CFTR,是细胞膜上的跨膜离子通道,对于细胞盐和水平衡的维持至关重要。 最常见的囊性纤维化致病基因突变,被称为delta F508,会破坏CFTR折叠为正确形态并运至呼吸道及其他器官细胞膜的过程。绝大多数这种缺陷型CFTR蛋白被错误加工并被降解。 细胞合成CFTR蛋白并将其有功能的形态运输到细胞膜,这一机制很重要,但人们对其了解却并不多。生成有功能的蛋白有多个步骤,包括基因转录和翻译后加工,MicroRNA
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