LCMV ELISA KIT

LCMV ELISA KIT

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实验器材

酶标仪（波长450 nm），10 μL 、100 μL 、1 mL移液器，300 μL多道移液器，移液器吸头、37℃恒温水浴箱。

 

操作步骤

1. 将浓缩洗涤液（10X）用蒸馏水做10倍稀释，配制成工作洗涤液。
2. 取出包被有LCMV抗原的96孔酶标板在室温平恒回温，在加样品前拆开密封的铝箔袋。
3. 将待检样本用稀释缓冲液做1: 200稀释，100 μL/孔，加入各反应孔。（加样过程须在15 min内完成）
4. 置37℃恒温培养箱避光反应1 h ，孵育完成后弃液，并用工作洗涤液250 μL/孔洗涤90s ，洗涤三遍，在无纤维纸上拍干。
5. 根据待测样品数量取相应体积的酶标山羊抗人二抗并用稀释缓冲液1:1000倍稀释（现用现配），100 μL/孔，置37℃恒温培养箱避光反应1 h 。工作洗涤液250 μL/孔洗涤90s，洗涤四遍，在无纤维纸上拍干。
6. 用移液器加TMB底物显色液100 μL/孔（提前恢复至室温），37℃避光反应5min ，请勿震荡。
7. 移液器加终止液50 μL/孔，稍微震荡5s混匀。
8. 15min内用酶标仪450 nm波长处读数。

 

注意事项

1. 试剂盒各组分使用前应室温平衡至少20min 。浓缩洗涤液复温前瓶底会有结晶物，切记完全溶解后再做稀释用。
2. 样品如为冻干制剂，应用样品稀释液充分溶解混匀后再用。
3. 反应时应将酶标板放入洁净的密闭空间中，防止反应孔中落入异物。
4. 洗涤拍干后，应消除各孔内残余的气泡。
5. 开封后，将未使用的板条放回加入干燥剂的密封铝箔袋中，置4℃密闭保存。
6. 在操作过程中，使用全新洁净的移液器吸头、洗涤机（瓶）、器皿等。
7. 本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床实验和人体实验，否则所产生的一切 后果，由实验者承担 ，本公司概不负责。

 

结果判定

实验结果须满足以下有效参数为成立：

• 阳性孔参考值：OD₄₅₀ >0.100；
• 阴性孔参考值：OD₄₅₀ ≤0.100。

 

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