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- XFS90064
- 2025年07月15日
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![CCRF-CEM [CCRF CEM]细胞专用培养基](https://img1.dxycdn.com/p/s14/2025/0605/102/4249530806187940391.jpg!wh200)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
5
- 规格：
96T
产品货号：XFS90064
产品规格：96T
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
本产品仅供科研实验用，不做其他用途！
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免
反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验上释放出来,取而代之的是GTP,从而将Ras激活,GEF的活性受生长因子及其受体的影响。另一个控制Ras蛋白活性的是GTP酶激活蛋白(GTPase activating protein, GAP),存在于正常细胞中,主要作用是激活Ras蛋白的GTP酶，将结合在Ras蛋白上的 GTP水解成GDP，成为失活型的 Ras蛋白—GDP。所以在正常情况下，Ras蛋白基本上都与 GDP结合在一起，定位在细胞质膜内表面上。
，但其酶活性较低。而GTP酶激活蛋白(GAP)则能促进GTP酶活性，使Ras蛋白水解GTP的速度提高1万倍，因此也是Ras通路的重要调节因素。另外，活化的Ras能直接结合并激活磷脂酰肌醇―3―激酶(P13K)的P110催化亚基，P13K活化后将二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)转化而生成第二信使三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)，然后通过Rac／Cdc42等来调控细胞骨架运动，以及通过激活生存信号激酶PKB／AKT等靶蛋白来调控细胞生存。另外，鸟嘌呤解离刺激因子(RalGDS)是一种Ras相关蛋白Ral的GTP
现在各种癌组织中 ras 基因仅在第 12 或 61 密码上发生了点突变（病毒癌基因在第 59 位密码子上）导致氨基酸的取代。 带有GTP的Ras是有活性的，可以作用其靶分子，然后内在的GTPase 活性使 GTP 水解成 GDP ，而 GDP 的 Ras 成为失活状态，从而终止了其作用，有两种蛋白调节 Ras 蛋白从激活状态到失活状态相互间的转变。 （1） GTP 酶激活蛋白 GAP 刺激内在的 RasGTPase 使其水解被结合
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