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分子生物学常用实验技术（page 3)

经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤: (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA 原位变性。 (2) 将DNA 片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。 (3) 预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。 (4) 让探针与同源DNA 片段杂交,然后漂洗除去非特异性结合的探针。 (5) 通过显影检查目的DNA 所在的位置。 　　 Southern 杂交能否检出杂交信号取决于很多因素,包括目的DNA 在总DNA 中所占

原位杂交组织化学实验技术

核酸链都游离在溶液中，而固相杂交是将参加反应的一条核酸链固定在固体的支持物上（常用的有硝酸纤维素滤膜，其它如尼龙膜、乳胶颗粒和微孔板等），另一条参加反应的核酸链游离在溶液中。固相杂交有菌落原位杂交（colony in situ hybridization）、斑点杂交法（Dot blot）、Southern印迹杂交（Southern blot）、Northern印迹杂交（Northern blot）和组织原位杂交（Tissue in situ hybridization），即原位杂交组织

细胞培养大攻略

，有些说直接解冻后就可以加入到培养基中；我配制胰蛋白酶 液，用的是D-PBS，有关系吗？ 答：关于血清的热灭活，是很多人感兴趣也存在一定争议的话题。大多数实验室将血清的热灭活还是作为常规来执行，因为有两个作用，第一是灭活补体，第二是灭活血清中可能存在的支原体。但是实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子 、氨基酸 等成分带来的负面影响。我在实验室处理血清的时候，有一次水浴 箱在灭活过程中出现故障，温度升高到80 ℃，血清变成了凝胶状，我重新处理了另外一份血清，将两份血清对比，发现高温直接