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48T
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文献和实验培养细胞由于加入淋巴细胞而受到的障碍之一。在理论上,一般认为这一反应不属于免疫反应。从 A、 B两系纯种小鼠育成杂种一代 A× B,若将 A的淋巴细胞加在来自 A× B的培养细胞(非淋巴系细胞)中,则 A的淋巴细胞识别来自 B的抗原的结果,便引起免疫反应,给培养细胞带来障碍。另一方面将 A× B的淋巴细胞加到来自 A的培养细胞中去时,由于 A× B个体理应保有来自 A的全部抗原,不能认为是免疫反应。不过在那种情况下也看到培养细胞的障碍,这叫同种异体抑制。
Adenovirus Cre Intranasal Infection Information & Protocol腺病毒鼻内感染小鼠 Jacks Lab, Center for cancer research,MIT http://web.mit.edu/ccr/labs/jacks/protocols/AdenovirusCre.html REAGENTS: MEM (Sigma catalog #M-0268)
和20微升充分重悬的Protein A+G Agarose,4℃缓慢摇动30分钟至2小时。2).2500rpm(约1000g)离心5分钟,取上清用于后续的免疫沉淀。注意事项:所谓种属相同的IgG是指,例如后续免疫沉淀时用的是小鼠IgG,则在本步骤中可以加入normal mouse IgG,如无normal IgG可以加入其它不影响后续检测的其它mouse IgG类型的抗体。通过和normal IgG和Protein A+G Agarose的孵育,可以充分降低非特异性的结合,降低背景。 免疫沉淀:采用
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