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- 文献和实验
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- 供应商:
上海科顺
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9999
- 检测范围:
酶联免疫
双抗夹心法ELISA 原理:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子,但不适用于小分子抗原。将特异性抗体(捕获抗体)与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品,保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体(检测抗体)保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。 双抗原夹心法测抗体的反应模式与测抗原相似,用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。
优点:高特异体 性,使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的;适用于复杂样品,抗原不需要进行纯化即可用于检测;灵活性更大,灵敏度更高,可采用直接法也可采用间接法。
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文献和实验S1 Nuclease Protection Assay End-label oligo (20-25 mer)4 µl 5X T4 Kinase Buffer5 µl [gamma-32P] ATP (7000 Ci/mmol)10 µl water + oligo (200 ng)1 µl T4 Kinase1. 37 deg C for 1 hour.2. Heat inactivate at 75 deg C for 10 minutes.3. Add 1 µl glycogen
4. Vortex vigorously. 5. Incubate at 100 deg C for 3 minutes. 6. Transfer immediately to 58 deg C and incubate overnight. S1 digestion buffer (final concentration): 300 mM NaCl 30 mM sodium acetate, pH 5.5 2 mM zinc sulfate 1000 units/ml S1 nuclease
相关专题 S1核酸酶 S1核酸酶来源于稻谷曲霉(Aspergillusoryzae),是一种高度单链特异的核酸内切酶,在最适的酶催反应条件下,降解单链DNA或RNA,产生带5,-磷酸的单核苷酸或寡核苷酸。对双链DNA、双链RNA和DNA-RNA杂交体相对不敏感。通常水解单链DNA的速率要比水解双链DNA快75000倍。这种酶需要低水平的zn2+的激活,最适pH范围为4.0~4.3。一些螯合剂(如EDTA 和柠檬
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