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- 文献和实验
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- 供应商:
上海科顺
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9999
- 检测范围:
酶联免疫
双抗夹心法ELISA 原理:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子,但不适用于小分子抗原。将特异性抗体(捕获抗体)与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品,保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体(检测抗体)保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。 双抗原夹心法测抗体的反应模式与测抗原相似,用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。
优点:高特异体 性,使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的;适用于复杂样品,抗原不需要进行纯化即可用于检测;灵活性更大,灵敏度更高,可采用直接法也可采用间接法。
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文献和实验缩合或醇醛缩合。例如: 在碱或酸性溶液中加热时,β-羟 基醛易脱水生成α,β-不饱和醛。例如: 含有α氢原子的酮也可以发生类似的反应,生成β-羟 基酮,脱水后生成α,β-不饱和酮。 (三)还原反应 醛或酮经催化氢化可分别被还原为伯醇或仲醇。 醛、酮与氢化铝锂(LiALH4)、硼氢化钠(NaBH4)或异丙醇铝(AL[OCH(CH3)2]3)作用,也都还原生成相应的醇。这些还原剂具有较高
热稳定性聚合酶(1,2)产生PCR产物提供一个匹配碱基。如表1总结的,这些聚合酶常常以不依赖模板方式在扩增产物的3’端加上一个脱氧腺苷酸(3,4)。pGEM®-TEasy高拷贝数载体包含有T7和SP6RNA聚合酶启动子,其侧翼和多克隆位点区相接,多克隆位点区位于β半乳糖苷酶的α肽编码区内。α肽插入失活允许在指示培养基用颜色直接筛选重组克隆。另外这两个载体的多克隆位点区的限制性酶切位点适用于采用Promega公司Erase-a-Base®系统(产品目录号#E5750)产生一系列巢式缺失
17 载体 [44 ] ,含有玉米 ubi-I 启动子和胭脂碱合酶终止子 (nos)(引物上含有限制性酶切位点,如果使用其他载体如 pStarling 和 pStargate,请查看网址 http ://www. pi. csiro. au/RNAi/ vectors, htm)。 ( 4 ) 克隆 PCR 产物的 pGEM-T 载体(Promega) ( 5 ) PCR 纯化试剂盒或柱子( Promega 或其他公司) ( 6 ) DNA 模板(20 ng
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