大鼠 TUBB (Tubulin Beta) ELISAKi

大鼠卵巢颗粒细胞的分离方法

大鼠颗粒细胞的分离方法一：分离23天的SD大鼠，皮下注射DES（2.5 mg/只），连续三天。于最后一次注射24 h后，颈椎脱臼处死动物。无菌收集两侧的卵巢，置于盛有PBS的EP管中清洗。将PBS清洗的卵巢放在盛有培养基的平皿中，在体视显微镜下，用25号针头刺破卵泡，释放出颗粒细胞。后吸取平皿中的细胞悬液，镜下计数，接种细胞。培养基（McCoy's 5A Medium），加谷氨酰氨，用碳酸氢钠调节PH值为7.2。参考文献：1.Down-Regulation of Steroidogenic

【原创】转载Western Blot 内参选择攻略（美季生物技术有限公司）http://www.majorbio.cn/NewsInfo.asp?id=289

Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。第三种，当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开，然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。 常用的蛋白质内参有GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin

【原创】Western Blot为什么必须要用内参？

Blotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。常用的蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。最近的国外文献报道中使用GAPDH内参的较多。：GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30－40kDa的亚基组成，分子量146kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。GAPDH检测。Western Blotting(检测条带大约在36