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- 2025年07月14日
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深圳顺辰生物科技有限公司
BrdU细胞增殖检测试剂盒
描述：
BrdU检测试剂盒用于细胞和组织切片的细胞增殖检测。BrdU(5-Bromo-2-deoxyUridine)，即5-溴脱氧尿嘧啶核苷，是胸腺嘧啶核苷(T)类似物，检测原理为BrdU可以通过竞争替代胸腺嘧啶核苷T掺入DNA合成期(S期)。当处于旺盛分裂的细胞掺入BrdU后，利用抗BrdU抗体和抗体连接酶或荧光素作为指示系统，即可检测出含有BrdU的细胞，结合其它细胞标记物进行双重标记，可判断出增殖细胞的种类、增殖速度等，对研究细胞动力学有重要意义。BrdU经活体注射或细胞培养时进入组织细胞，掺入DNA定位准确，可有效反应S期细胞新合成DNA的水平，而且受细胞内外环境影响小，标记不会丢失。
注意事项：
1. 对于细胞爬片样品，BrdU的使用浓度和处理时间与细胞种类有关。一般来说，处理肿瘤细胞所需浓度和时间都较低，成纤维细胞或上皮细胞等增殖较慢的细胞需要提高浓度并延长作用时间，建议浓度范围为20-100μM，作用时间为40min-4h，可根据具体细胞的种类进行摸索调整。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验willion1985 直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一，是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法，其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物----BrdU进行检测。因为在细胞周期的S期，和细胞一起孵育的BrdU能渗入DNA分子中，再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合，就能够检测到DNA复制活跃的细胞。 但BrdU有一大缺点，就是需要变性DNA后才能与抗体结合，但这就破坏了DNA双链结构，影响了其他染料的结合
5-brdu 的分子量为307.1，将100mg分为三份30.7mg（0.1mmol），溶于1ml三蒸水，分装-20度保存。用的时候再稀释100倍，如在1ml溶液里加入10ul即可。尽量分装为小剂量，如100ul，避免反复冻融使其活性降低。1、BudR贮存液的配制BudR 5mg（先用0.5ml 1N NaOH溶解）然后加蒸馏水至5ml，即成1000ug/ml的贮存液，因BudR遇光会发生分解，贮存液需置棕色瓶并黑纸封瓶避光冰冻保存。 一般用的是用10μg/ml终浓度。2、终止细胞培养前，加入
1． 细胞以 1.5 × 105 /ml 细胞数接种于直径 35ml 培养皿中（内放置一盖玻片），培养 1 天，用含 0.4 ％ FCS 培养液同步化 3 天，使绝大多数细胞处于 G0 期。 2． 终止细胞培养前，加入 BrdU （终浓度为 30 μ g/L ）， 37 ℃，孵育 40min 。 3． 弃培养液，玻片用 PBS 洗涤 3 次。 4． 甲醇 / 醋酸固定 10min 。 5． 经固定的玻片空气干燥， 0.3 ％
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