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78573-45-2
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250m
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文献和实验相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。 液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。 反相色谱法 一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、异丙醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。 随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用
、中和、干燥活化,使其表面保持自由硅醇基,如酯化键合,又如聚合键合固定相:R为十八烷基(-C18),辛烷基(-C8),苯基(C6)或C2等,采用极性强的溶剂做流动相,如水、甲醇、乙腈等。R也可以是CN、苯基等基团,采用极性弱的溶剂为流动相。 正相色谱与反相色谱的区别可用下表来说明: 固定相的分离选择性决定于可被保留组分的保留强度;所以固定相的选择将取决于分析物质和样品溶剂的性质。 分析物的极性与固定相极性非常相似时,可得到分析物的最佳保留,两者极性越相似保留越好,所以要尽量选择极性
于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。 涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。由于涂布式固定相很难避免固定液流失,现在已很少采用。现在多采用的是化学键合固定相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。 液液色谱法按固定相和流动
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