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磷脂酶 A2(phospholipase A2,PLA2)试

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  • 上海富雨生物
  • FY-25JY157
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  • 2025年10月26日
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      上海富雨生物

    磷脂酶 A2(phospholipase A2,PLA2)试剂盒

    测定原理

    磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱(HEPC)产生游离巯基,与DTNB反应生成黄色物质,在412nm处有特征吸收峰。

    自备实验用品及仪器

    天平、超速冷冻离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。

    试剂组成和配制

    提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

    试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

    试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。

    试剂三:液体×5 瓶,-20℃避光保存。临用前根据用量每瓶加入 1.8mL 试剂二充分混匀。(3天使用完)

    样品处理

    1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心5min,取全部上清于4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于1mL试剂一。

    2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后于4℃,10000g 离心5min,取全部上清于4℃、100000g 离心 30min,弃上清,取沉淀溶于1mL试剂一。

    3. 血清:直接测定。

    测定操作

     

    对照管

    测定管

    样品(μL)

    20

    20

    试剂二(μL)

    180

     

    试剂三(μL)

     

    180

    充分混匀,37℃反应 10min,于微量石英比色皿/96 孔板,蒸馏水调零,测定 412nm 处吸光值,记为 A 对照管和 A 测定管,△A=A 测定管- A 对照管

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    该产品被引用文献

    Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data 期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16 作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1 DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003

    相关实验
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